Glavni pristupi za prenatalnu dijagnostiku genetskih bolesti. Direktan dijagnoza genetskih abnormalnosti.

Metode molekularne dijagnostike - glavni proizvod i primarne strukture alata za analizu, i.e. redoslijed nukleotida u molekulu DNK - genoma baze (nasljedne aparata) osoba. Prva faza je Grand International dešifrovanju molekularnu strukturu DNK programa istraživanja na ljudima je završena 2000. godine, stvarajući "nacrt ljudskog genoma." U ovom dijelu se ograničimo na ističući osnovne principe metoda zasnovan na DNK. Detaljnije sa tehnikom molekularne studije mogu se naći u posebnim monografija i udžbenika.

DNK-based dijagnostičke metode, usmjerene na identificiranje mutacija ili molekularne mutanta kromosom obilježavanje je PCR sinteze DNA (PCR). Istorijski ranije način izbrisati Southern hibridizacije se trenutno koristi mnogo rjeđe, iako se koristi za identifikaciju pojedinih mutacija, posebno dinamičan mutacije ", što je dovelo do širenja bolesti (Fragile-X sindrom, miotonicheskayadistrofiya, Huntington chorea, broj neurodegenerativnih bolesti) i hemofilija a, kao i neke druge bolesti.

PCR metodom je predložen 1983. godine od strane američkih naučnika Curry Mullis nagrađen za ovo otkriće Nobelovu nagradu 1993. godine, Metode sinteze selektivno omogućava (pojačani) in vitro relativno malim DNK segmenata i dužinom od nekoliko desetina do nekoliko kilobazne, koristeći kao predložak DNK iz bilo kojeg sadrže pojačan sekvencu.

neophodan uslov za PCR je znanje o nukleotida slijed umnožene DNK regiju, kao specifičan izbor lokacije vrši hibridizacijom predloška DNK sa dva umjetno sintetiziran Primer - DNK oligonukleotida sekvence, obično od 15 do 30 bp komplementarne 3`-termini od pojačan dio u smislu i antisens niti DNK, odnosno. Razmak između prajmera određuje dužinu sintetiziran molekula. Detalji o PCR tehnike produkcije mogu se naći u priručnicima.

PCR metoda On je postao glavni u molekularnoj dijagnostici genetskih bolesti. Razvijen i naširoko koristi u praksi, različite varijante ove metode za brzo i efikasno identificirati mutacije, studija DNK polimorfizama za molekularnu označavanje mutanta hromozoma.

Trenutno, postoje dva osnovna pristupa prenatalnu dijagnostiku, kao i općenito u dijagnosticiranje genetskih bolesti:
- direktan dijagnoze na osnovu neposredne identifikaciju mutacije u određenom genu;
- posredno (indirektno) dijagnostika, koja se zasniva na označavanje mutirani gen (ponekad se naziva obilježavanje "pacijent" kromosoma koji nose mutirani gen) pomoću molekularnih markera.

Direktan dijagnoza genetskih abnormalnosti

Kroz direktne dijagnoza Identifikacija mutacija u genu. Prednosti metode - visoka (skoro 100%) dijagnostička preciznost, mogućnost PD i informativne analize (pogodnost za molekularnu dijagnostiku) porodice i identificiranje heterozigotnih nosača u odsustvu djeteta pacijenta.

u nema većih mutacijama gena To zahtijeva detaljnu molekularne analize (skeniranje) primarnu strukturu gena za otkrivanje mutacije koje se može pripisati nedostatke metode.

Osnova svakog monogenskih bolesti su kršenja gena funkcija, uzrokovane različitim mutacijama u semantički dijelovima, odnosno, gen sekvence kodiraju sintezu proteina (cDNA). Vrsta i mutacija spektra, kao i njihove fenotipske ekspresije (težine bolesti) su specifični za svaki gen i uglavnom određuje jedinstvene karakteristike njegove primarne strukture (sekvenca nukleotida).

Takođe je poznato da je učestalost različitih mutacije u svaki gen je drugačija. Česti su "više sile" mutacije, dijagnostičke vrijednosti što je posebno visoka, a "mala" (jedan sporadični), registrovanje izuzetno rijetko. Za mnoge od gena odgovornih za nasljedne bolesti, mutacija spektri su dobro proučeni i razvijeni optimalno algoritama za njihovu identifikaciju. Na primjer, pozitivan za gen za cističnu fibrozu je delF508 mutacija, koja se nalazi u skoro 50% svih mutanta hromozoma u CF pacijenata u Rusiji za gensku fenilalanin - to R408W mutacije otkrivene Y45% pacijenata sa fenilketonurijom u Rusiji, za distrofina gen odlikuje dovoljno velike delecije, zabilježen je u 60% od X kromosoma kod pacijenata sa Duchenne mišićne distrofije, itd

detaljnije Algoritmi za molekularnu dijagnostiku razne monogenskih bolesti se daju u posebnim vodiči, recenzije.