ADAMTS13

Tako je, u normalnim uvjetima ovog proteaza cijepa von Willebrandov faktor polimera i stvara normalan i niske molekularne težine.

Nedostatak ADAMTS13 igra važnu ulogu u patogenezi tromboze trombocitopenična purpura (Moshkovitsa sindrom), budući da je neuspjeh ove metaloproteinaze velikih polimera od vWF su odgovorni za nekontrolisano formiranje mikroagregata trombocita, mikrocirkulaciju blokiranje. U posljednjih nekoliko godina, smanjenje ADAMTS13 nije pronađena samo na mikroangiopatija sindroma, ali i kod kroničnog glomerulonefritisa, sepsa, ciroza jetre, DIC, i još mnogo toga.

Princip metode

Princip metode (ELISA) na osnovu specifičnog vezivanja ADAMTS13 molekula antitijela na površini mikroploče. Nakon uklanjanja supstance koje nisu vezani za mikroploča, inkubirani sa enzim-označeni antitijela (konjugirana). Kao rezultat toga, na površini mikroploča javlja pristupanju antitijela označeni enzim komplekse postojećih gena anti-antitijela. Dodano nakon pranja 3,3`, 5,5`-tetra-metilbenzidin za procjenu aktivnosti enzima karakterističnih za bojenje testa mješavina. intenzitet boje je proporcionalna aktivnosti enzima i prema tome, broj ADAMTS13 u uzorku.

Video: TTP ADAMTS13

Reagensa i opreme

• Microplate bunara obložene antitijela na ADAMTS13.
• Uzorak tampon.
• Wash Buffer.
• A rješenje hromogena / podloge (hromogena - tetramethylbenzidine, podloge - vodikov peroksid).
• Stop Solution.
• Oprema za izvođenje ELISA (pranje suđa, čitač za tablete i druge.).

Distributer dijagnostički kit reagensa - CJSC "BIOHIMMAK".

Uzorci krvi za studiranje kao uzorak za određivanje koncentracije ADAMTS13 BTP korištenja stabilizirala natrij citrata krvi.

tehnika performanse

Slijed akcija laboratorije doktora u određivanju nivoa ADAMTS13 treba strogo slijedite upute za set reagensa. Kalibratori Preporučuje se da se istraži u duplikatu definicijama.

Video: ADAMTS13 Teil 1

Rezultati evaluacije istraživanja kako bi se utvrdilo je potrebna koncentracija ADAMTS13 za izgradnju krivulje kalibracije. Na krivoj kalibracije ležala vrijednosti apsorbancije mjerenja uzoraka kalibracije. Zatim se međusobno tačka se vrši kriva kalibracije za određivanje koncentracije ADAMTS13 ( "point-to-point»). Normalno, koncentracija ADAMTS13 je 50-140%.

Interpretacija rezultata ADAMTS13 studije - a metaloproteinaze cijepa von Willebrandov faktor. Niske koncentracije i / ili smanjenja ADAMTS13 aktivnost idiopatska uzrok tromboze trombocitopenična purpura (Moshkovitsa sindrom). Moshkovitsa sindrom karakterizira pet glavnih kliničke manifestacije: neurološki poremećaji, disfunkcija bubrega, hemolitička anemija, trombocitopenija, groznica. Bolest je teško, bez pathogenetically zasniva liječenje smrtnost dostiže 90%. Sindrom Moshkovitsa često pokazuju pad u ADAMTS13 koncentracije manje od 10%. Međutim, mnogo više od pomoći za dijagnosticiranje ove patologije je određivanje ADAMTS13 aktivnosti, kao u ovom slučaju, osim za kvantitativno smanjenje ove inhibicije se može otkriti metaloproteinaze autoantitijela.

Mutacije u genu kontroli sintezu ADAMTS13, u stanju da utvrdi čestih recidiva tromboze trombocitopenična purpura. Kliničke manifestacije naslijeđenih nedostatka ADAMTS13 sindrom zove Upshawom-Schulman (Upshawom-Schulman). U ovom nivou sindrom ADAMTS13 je manje od 6,7%.

U vrijeme pisanja monografija, nažalost, nisu definirani jasno razlikovanje funkcija tromboze trombocitopenična purpura i sindrom hemolitičke uremičnog. Ipak, većina stručnjaka imaju tendenciju da vjeruju da je sindrom hemolitički-uremičnog ne poštuje smanjenje ADAMTS13, tako da je ova brojka je vrlo značajan za diferencijalnu dijagnozu ovih uvjeta opasne po život.

Uzroci grešaka

• Neuspjeh Temperatura režim reagensa za pohranu.
• prekršajne postupke za pranje (u slučaju ručno pranje koje treba oprati najmanje 4 puta).
• Miješanje reagensa iz različitih mjesta.
• Kondenzacija vlage unutar bunara (radi sprečavanja nastanka kondenzacije ne bi trebalo da bude otvoren do paket dok se ne zagrije na sobnu temperaturu).

Ostale analitičke tehnologije dodatak reagensa za mjerenje koncentracije ADAMTS13 postoji metoda za određivanje aktivnosti metaloproteinaze. Nedostatak aktivnosti uzrokovane mutacijom ili prisustvo autoantitijela protiv ADAMTS13.