Poteškoće i greške u mjerenju određenih hormona

Izmjeriti razinu hCG u mokraći seruma - najčešći laboratorijskih testova u ginekološkoj endokrinologije. Postoji imunohemijski mjere test sistem koncentraciju samo netaknuta hCG molekula (dimer koji se sastoji od - podjedinica) (? Oba slobodna i članovi dimera), koncentracija samo slobodne podjedinice i koncentracija svih podjedinica. Treći tip testa sistema pruža najviše informativne rezultate i koristi se najčešće. Čak iu najbolji test sistema u 1% slučajeva, tu je cross-reakcije sa LH, tako da je nivo rezultata mjerenja podjedinica hCG u niskim koncentracijama (< 5 МЕ/л) могут быть недостоверными Фолликулостимулирующий и лютеинизирующий гормоны. Для измерения уровне ФСГ и ЛГ разработано множество тест систем на основе РИА, иммунохемилюминесцентного анализа, ИФА. Все эти тест-системы обладают высокой чувствительностью и специфичностью, но откалиброваны они по разным эталонным стандартным образцам. В некоторых эталонных образцах биологическая активность ФСГ и ЛГ не соответствует их иммунореактивности. Если при калибровке тест-системы был использован подобный эталонный образец, то эта тест-система будет давать ложноположительные или ложноотрицательные результаты.

Prolaktin. Test sistemi za mjerenje prolaktina imaju vrlo visoku osjetljivost i specifičnost. Uputstva za test sistem u većini slučajeva su normalne koncentracije prolaktina opsega za normalno vrijeme mjerenja (8:00-11:00). U međuvremenu, nivo prolaktina u serumu varira tokom dana. Konkretno, u ranim jutarnjim satima tamo sekreciju prolaktina vrhunac. Ako prolaktin izmjerene tokom ovih sati, njen nivo u odnosu na standardne navedene u uputstva mogu biti pogrešno smatrati povišen. Dugi niz godina se vjerovalo da palpaciju dojke, kao i prijem lišiti bogata tirozin, triptofan ili arginin stimuliše lučenje prolaktina i hiperprolaktinemija imitiraju. Nedavna studija provodi našoj grupi odbacuje ove ideje.

Thyroidin hormona i TSH. Metode mjerenja ovih hormona su najbolje praćka. Široko dostupna visoko osjetljivim test sistem za određivanje ukupnog i slobodnog T3 i T4. Test sistem za merenje sa ultravisoke osjetljivost TSH - a femtomolar raspona. Ovaj arsenal test sisteme sa visokom preciznošću dijagnosticirati kao hipotireoza i tireotoksikoza.

Video: Šta ako svaki put kada pokrenete Word vodi Ured za prilagođavanje

Estradiol. Ovaj hormon je prisutan u serumu uglavnom vezani oblik, odnosno u kompleksima sa albumin i SHBG, kao i na konjugata glukuronska kiselina i sulfata. Udio slobodnog estradiola je manje od 3% od ukupnog sadržaja u serumu. Samo slobodan estradiol je povezana sa intracelularne receptore estrogena i na taj način regulira mnoge procese u reproduktivni sistem, kao što je lučenje LH i FSH iz hipofize i razvoj folikula u jajnicima. Stoga za procjenu reproduktivne funkcije najvažnijih mjerenje nivoa slobodnog estradiola. Koncentracije slobodnog estradiola u serumu malih: kod žena u reproduktivnom dobu, oni se razlikuju u zavisnosti od faze menstrualnog ciklusa, u rasponu 25-450 ng / L, kod djevojčica u različitim fazama puberteta - 3-45 ng / ml, i postmenopauzi obično ispod 30 ng / ml. Stoga, dijagnoza poremećaja seksualnog razvoja u djevojčica i neplodnosti kod žena, kao i pregled kod žena u postmenopauzi treba imati na umu da imunohemijski test sistem za mjerenje estradiola, koji se koriste u javnim i privatnim kliničke dijagnostičke laboratorije mogu imati nedovoljna osjetljivost. Osim toga, rezultati estradiola mjerenja u jedan te isti pacijent u različitim laboratorijima široko može varirati.

Čak iu najosjetljivije i specifične imunohemijska test sistema za mjerenje slobodnog estradiola u 1-2% slučajeva postoji cross-reakcije sa vezanog estradiola. Ovaj krst-reakcija može dovesti do lažno pozitivnih rezultata ako se poveća iznos estradiol (npr sa viškom formiranje svojih konjugata). Metoda najosjetljivije i specifične za mjerenje slobodnog estradiola - masenom spektrometrijom prije Hromatografska odvajanje vezanog hormona, ali ova metoda je komplikovan, dugotrajan i dostupni su samo za specijalizirane laboratorije. otkriveni su nedavno estrogen receptore u vanjskoj staničnoj membrani pojedinih ćelija. Po svemu sudeći, uz receptor interakciju ne samo besplatno, ali i koji se odnose na estradiol. Stoga, rezultati mjerenja slobodnog estradiola ne može odgovarati na ukupnu biološku aktivnost estradiola u serumu.

Video: prostatitis bazen

Drugih steroidnih hormona. Sve ono što je rekao o kompleksnosti mjerenje estradiola, odnosi se i na druge steroidnih hormona, njihovih prekursora i metabolita. Na primjer, testosteron cirkuliše u krvi pretežno u obliku kompleksa sa SHBG, i kortizola - kao kompleksa proteina Transkortin. Stoga, u kliničkim dijagnostičke laboratorije koriste imunohemijski sistem test dva tipa: za mjerenje ukupnog testosterona ili kortizola i za mjerenje slobodnog hormona. Najveći poteškoće u mjerenju slobodnog testosterona. Referentna metoda se smatra masene spektrometrije prije hromatografsko odvajanje slobodnog i vezanog hormona, ali ova metoda je dostupna samo specijalisti laboratorija. Širok-dijagnostičkih laboratorija za mjerenje slobodnog testosterona do sredine 2000-ih koristi pogodno RIA metodom uz prethodnu ekstrakciju seruma slobodnog testosterona, koristeći organske rastvarače. Rezultati RIA su bili vrlo blizu onima metoda masovne spektrometrije. Međutim, RIA je izbačen iz opće laboratorijske prakse i analize immunohemilyuminestsentnym i FA. Ove metode često proizvode lažno pozitivne rezultate, naročito pri mjerenju uzoraka s niskim koncentracijama testosterona. Ovu činjenicu treba uzeti u obzir pri procjeni nivoa slobodnog testosterona kod žena, dječaka u prepubertetskog i početkom puberteta kod muškaraca za koje se sumnja disfunkcijom Lejdigovih ćelija. Treba napomenuti da je razvoj i primjena metoda za imunohemijska analizu steroidnih hormona, postoje i druge poteškoće. Na primjer, u pripremi steroida primarnih antitijela da poboljšaju svoje imunogenost ih konjuguje sa različitim nosačima kao što je metil albumin. Prilikom kreiranja test sistemi bazirani na RIA steroidima tag ³H ili ¹⁴C (jer ne mogu biti označeni ¹²⁵I). Stoga laboratorija primjenom takav test sistem mora imati scintilacioni brojač čestica.