Stabilizacija imunoglobulina haptens. Zavisnost konformacija antitijela temperature

Postoje podaci iz različitih metode, ukazujući da se poveća stabilnost antitijela i njihove Fab-fragmenti rezultat kompleksa sa haptens. Na primjer, pored ovih povećava stabilnost Hapten molekula denatiruyuschemu akciji Guanidine hidroklorid (Cathou, Werner, 1970), kao i akcije himotripsin (Grossberg e. A., 1965).

IgM antitijela i stabilizirati specifične haptens u odnosu na proteolizu sa subtilisin i himotripsin (Ashman, Metzger, 1971). Dokazano je da smanjenje osjetljivosti na napade proteaza IgM potpuno zbog promjene svojstava Fab-fragmenata. Prema našem modelu, to prebacuje ravnotežu Hapten komponente A i B Fab-fragment lijevo.

Dakle, da objasnim citirano dovoljno da bi se iznad rezultata da je slobodna energija je kompaktniji Conformer A niže slobodne energije Conformer B (t. e. A-Conformer stabilniji nego B). Ako je tako, onda je povećanje u stabilnosti proteina ne bi trebalo da zavisi od toga koliko odgovarajuće ravnoteže pomak izazvali.

Zaista, pokazano je da je smjena A balans lijevo spin-označen dimeri lakih lanaca, simulirajući struktura Fab-podjedinica djelovanjem 1.2 M NaCl i 0,75 M (NH4) aS04 povećava njihovu stabilnost u odnosu na temperaturu. Sličan pomak u ravnoteži između A i B konformera uzrokuje druge narušavajućeg strukture proteina i njegove hidratacije ljuske agenata kao što su natrij dodecylsulfate i temperature.

zavisnost konformacionog stanja IgG temperatura otkrivene drugim metodama. Na primjer, G. Troitskii i saradnici (1971) i J. F. Kiryuhin i saradnici (1972) od strane optički rotacioni disperzija poštovati reverzibilni konformacione promjene temperature u tranziciji pH-zavisne od 27 ° do 38 °. Naknadno se pokazalo da je u neutralnom pH raspon temperature tranzicije ne zavisi od izoelektrične tačke IgG.

Međutim, kada pH, udaljena od izoelektrične trenutka kada je IgG molekula postaje veliko dovoljno vlastitih punjenja, temperatura konformacione prelaze su potpuno odsutni (Troitsky e. a., 1973). U VP Zavyalova i osoblje (Zavyalov e. A., 1975) sproveo višestruki istraživanje mijelom proteina konformaciju kao funkcija pH i temperature optičkim rotacioni disperzije, kružni dihroizam spektroskopija uznemirujuće, elektrokemijske iodination i diferencijal skeniranje kalorimetrije.

Utvrđeno je da kada pH je promijenjen 6,0-6,5 dostupnost chromophoric grupe otapala smanjuje. To može biti zbog promjene u broju optuženih grupa u proteina i smanjiti intermolekulskih elektrostatičke sile odbijanja. Sličan fenomen - zaštita dio tirozin i triptofan ostataka (pH 7,35- 0,01 M fosfatnog pufera) -nablyudali sa porastom temperatura od 25 do 35 ° C. Ovo se dešava na vezivanje Hapten dinitrophenyl homologne zec antitijela (IgG).

Ovi rezultati se mogu smatrati kao pokazatelj činjenice da porast temperature i formiranje specifičnog kompleksa sa haptens povećava njihovu kompaktnost, što je u skladu sa brojem radova u dispozitivu.