Taloga imunih kompleksa. Interakcija domeni antitijela lanaca

stanje agregacije imunih kompleksa ne treba miješati s fiksacijom Fc-fragment komplementa komponente, a samim tim i njihovo širenje u talog. Istraga o strukturi određenog talog antitijela sa antigenima izvršena putem spin oznaka (Grigoryan et al., 1969). Za označavanje proteina pomoću nitroxyl radikalni sintetiziran na osnovu maleimide. To kovalentno reaguju sa SH-skupine zec antitijela nakon redukcije sa 2-merkaptoetanol interchain disulfid obveznica. Kada je sačuvana ovu aktivnost antitijela.

Kao rezultat toga, padavine spin-označeni antitijela ovalbumin oznaka nastavila da slobodno rotira bez doživljava prostorni prepreka. S druge strane, nespecifični taloženje spin-označeni antitijela sa amonijum sulfata rezultiralo jakim imobilizacije oznaka. Ovi podaci ukazuju na mrežu, labave strukture talog imuni kompleksi.

U eksperimentima koristeći metod kružni dihroizam razlike su pronađene u spektru od tri homolognih antipnevmokokkovyh antitijela prije i nakon njihove interakcije sa specifičnim ligandima-geksasaharidny (Jaton e. a., 1975A). Proučavali smo promjene u spektru homolognih rekombinanata i hibridnih H- i L-lance djelovanjem na Hapten. Homologni rekombinantne antitijela imala spektar identičan spektru native antitijela, uprkos odsustvu interchain S-S-veze.

Promjene u spektru javljaju nakon vezivanja Hapten u sve tri nativnih antitijela, Fab-fragmenti i homologni rekombinantne molekule. Međutim, nije bilo nikakvih dokaza o konformacione promjene na interakciju Hapten sa getsrologichnymi rekombinantnog antitijela. Ovi rezultati potvrđuju promjenu u fluorescentnom kvantni prinos antitijela. Oni ukazuju na visoku specifičnost interchain interakcija u imunoglobulina.

jedinstvene informacije interakcije domena u lancima mogu se dobiti po izdavačima spin. Ova informacija ovisi o njegovoj proteina vezivanja. Odgovarajući aminokiselina ostataka (ili ostataka) na koje se obavezuju se javlja oznaka određuje se njegov hemijski sastav i označavanje stanja (npr pH). U našem radu (Käiväräinen, Nezlin, 1967a) proteini označeni sa dva iminoxyl radikala: 2,2,6,6-tetrametil-4-amino (N-dichlorotriazine) - R i imidozolidom (2,2,5,5-tetrametil -1-oksilpirollin-4-karboksilne kiseline) - R2. Ovisno o uvjetima maraka pristupanju su mogli komunicirati sa lizin ili histidin.

EPR spektar oznaka R, i R2 konjugovanog vjerovatno da li fanzina ostataka proteina sastoji od tri uske linije karakteristične slabo immobizirovannoy oznaka bez doživljava Steri-tomski opstruiraju makromolekula. Za razliku od toga, ovi spektar EPR spektar imunoglobulina G, oznakom R, (pretpostavlja se pristupanje ostatke histidin) sastoje se od pet komponenti.
takav Spectra ukazuju na sposobnost oznaku da se u dva različita mikrosredinu - A i B, koji se razlikuju u microviscosity.

Sličnost EPR spektar IgG i različitih podjedinica su navodno izazvalo zajedničko svim ovim konstruktivnim elementima, naime, domene, i njihove interakcije. Ova pretpostavka potvrđuje i činjenica da proteolize izoliranih domena L-lanac A-komponentu spektra odgovara oznaku nepokretnom, potpuno nestati. Važno je napomenuti da je, prema fizičko i imunohemijska metode pola L-lanaca (domene) zadrže svoje osnovne prostorne strukture svojstvene ih u sastavu netaknuta L-lanaca.

U eksperimentima na interakcija spin-označen Rt histidin ostataka na antitijela sa antigenima izolovan koristeći zec anti-ljudski hemoglobin antitijela, anti-goveđeg IgG i magarac anti-ljudski LGG. Pod našim eksperimentalnim spin etikete su bili povezani uglavnom sa Fab-fragmenata. Obrazac promjene EPR spektra spin-označeni antitijela reakcijom s antigenima ne zavisi od toga da li ili ne formira talog.

U svim slučajevima studirao, kompleksa spin-označeni antitijela sa antigenima rezultirao je omjer povećanja području A-komponentu na području centralna komponenta u odnosu na kontrolu ESR spektra. Osim toga, došlo je do smjene A-komponenta odgovarajuće povećanje imobilizaciju tagovi u državu. S obzirom da je područje A-komponenta je određen iznos od oznaka u ovoj državi, njena sve veća sredstva povećanje iznosa etiketa u A država ili povećanje trajanja ove države.