Toksoplazminom za imunitet u liječenju hroničnih toksoplazmoza

Toksoplazmoza - protozoa zoonoza sa latentnom preimuschestvennohronicheskim preko teče sa znacima porazheniyanervnoy sistem organa reticuloendotelijalnom sistema, cross-polosatoymuskulatury i organa vida.

Patogena - Toxoplasma gondii - obavezuje vnutrikletochnyyparazit sa složenim životni ciklus u kojem čovjek i bolee300 vrsta životinja i ptica su srednje domaćini.

Hitnosti studija toksoplazmoza diktira, prije svega, vežu ovaj patologije sa imunodeficijencije (singularitetima HIV infekcije). Osim toga, otkriva vodeni i jestivi vspyshkizabolevaniya [7]. S obzirom na visoku stopu infekcije u populaciji pouzdani (od 20 do 90% u različitim regijama svijeta) i polietiologichnostimmunodefitsitov (uključujući produžena glukokortikoida, citostaticima terapija, izloženost ionizirajućem zračenju it.d.), važno je proučiti uzroke reaktiviranja latentnoprotekayuschego procesa.

Dokazano je da je protok karakter određuje toksoplazmoza sostoyaniemimmunnoy mikroorganizam sistem [2]. Akutna toksoplazmoza (OT) razvija kao rezultat primarne infekcije toksoplazmamineimmunnogo mikroorganizam [4]. Evoluira RT reakcije kompleksprisposobitelnyh makro i mikro-organizam zakanchivaetsyaformirovaniem nesterilnim imunitet.

Dugoročni upornost agent u pratnji "plutajući" koncentracije specifičnih antitijela koje proizvodi klon antigen-spetsificheskihV memorija limfocita [1]. Ova faza bolesti nazyvaetsyahronicheskim toksoplazmoza (HT) i predstavlja prirodan proces iskhodomostrogo.

Dovoljnu količinu memorije T- i kliničke manifestacije B ćelija bolesti obuslovlivaetotsutstvie (latentna techenieHT). Međutim, u nekim slučajevima (1-5% inficiranih) proiskhoditreaktivatsiya latentna infekcija [3]. Ova kategorija uključuje "imunokompromitiranih" osobe, uključujući i sekundarne imunodeficijencije (HIV infekcije i jatrogeno - nekontrolisano antibiotik, citostaticima, glukokortikoida terapija, itd.)

Poznato je da je glavnu ulogu u prevenciji aktiviranje latentnogoHT pripada ćelijske komponente imunološkog sistema. Olovo prevencija zvenomv reaktivacije sinteze je značajan kolichestvainterferona-gama (IFNG) T limfocita senzibilizirani Toxoplasma antigena [5].

Od 1958. godine, na Klinici za infektivne bolesti RossiyskoyVoenno medicinskoj akademiji sproveo istraživanje razlichnyhaspektov HT-a. Embedded AP Kazantsev (1961) metoda spetsificheskoydesensibilizatsii toksoplazminom postiže otporan remissiiu 90% bolesnika nakon jednog kursa. Međutim, samo posledniegody, mogućnost studiranja imunog sistemybolnyh kemoterapije uz adekvatnu imunološkim metodama.

Svrha studije

Naučno obrazloženje toksoplazminom mehanizam djelovanja na osnovaniikompleksnoy evaluacija kliničkih laboratorija i immunologicheskogomonitoringa bolesnika s kroničnim toksoplazmoze.

Materijali i metode

Studija je obuhvatila 70 pacijenata s kliničkim manifestacijama obostreniyaHT (reaktivacija latentne HT). Dijagnoza naosnovanii prisutnost kliničkih pogoršanja perioda isklyucheniyadrugih sindromoskhodnyh bolesti infitsirovannnostitoksoplazmami detekcije (prisutnost specifičnih Ig G Toxoplasma, vyyavlennyhimmunofermentnym analiza) zamedlennogotipa izrečena preosjetljivost na antigene Toxoplasma rezultata intradermalnih probys toksoplazminom razrijeđen 10 puta s 0,85% natrij hloridanatriya. [Toksoplazminom predstavlja kompleks ćelijske membrane antigena naruzhnoypoverhnosti T. gondii (Strain RH) belkovoyprirody (t. N. SAG), dobijeni voda i eter vađenje (Odessa pogon za proizvodnju bakterijskih preparata).]

Svi pacijenti mjeriti količinu CD-4 +, CD-8 +, B-IgG + (monoklonalnymiantitelami po L.A.Kozhemyakinu et al., 1987), Ig G Toxoplasma (ELISA test-sistem "La Roche"), slika RTML sa toksoplazmennymantigenom (George et Vaughan, 1962 Bulankovas modifikacija YI i dr., 1993), "aktivan" interferon (u daljnjem tekstu - IFN-čin), "aktivan" interferon-gama (u daljnjem tekstu - IFN-g-act) i "aktivno" interferon-alfa (u daljnjem tekstu IFNa-ACP) biološka metoda. Takzheopredelyali ukupno koncentracija IFNG(U daljem tekstu - IFNG-Društvo) i interleukin-4 (u daljnjem tekstu - IL-4) ELISA korištenjem komercijalnih analizas test sistemi doo "Protein kontura" (Saint Petersburg) i "citokina" (Saint Petersburg). Chuvstvitelnostmetoda je 10 pg / ml. Osim toga (kontrolna grupa) ispitano je 10 bolesnika bez kliničkih manifestacija toksoplazmozav povijest (latentni oblik HT).

Svi pacijenti su bili podijeljeni u grupe prema effektivnostyuterapii. Grupa 1-58 pacijenata sa tranziciji latentnuyufazu bolesti (ciklične forme za simptomatske hronične toksoplazmozu), Grupa 2 - 12 cijena bolesnika s ponovljenim pogoršanje HT blizhayshegogoda nakon tretmana (za relapsno oblika simptomatske hronicheskogotoksoplazmoza). Kontrolna grupa - 10 klinički zdravih litss prisustvo Ig G Toxoplasma (za osnovnu latentna bolest) .Gruppy uporedivi pol, starost, harakterupitaniya, socijalni status, premorbidnoj pozadini.

Ispitivanje pacijenata je izvedena u dinamici u akutnim, neposredno nakon što je za imunitet toksoplazminom (intradermalno na rastvori sa povećanjem koncentracije obscheydoze do 0,3 ml domaćih droge), i 4 nedelje nakon okonchaniyakursa tretmana. Ni u jednom slučaju nije uočena strani reaktsiyna toksoplazminom administracije. Detalji metoda primjene liječenja kemoterapije toksoplazminav opisan u [1]. Pokazatelji imuno ćelije, koncentracija aktivnog interferona je i studirao u 3-6 mesyatsevposle tretman.

Statistička analiza rezultata koristiti program "Statgraphics pro pobjeda, ver. 3,0 "koristeći jednu i mnogovariantnogoanaliza, podgrupe analize (analiza podskupa), poređenje dva uzorka (parametarske i neparametarske), a faktor poshagovyyanaliz (p <0,05, F-to-ulazak = 4).

Rezultati istraživanja

Utvrđeno je da je u periodu od egzacerbacije (Tabela 1) u bolesnika sa značajnim promjenama HTnablyudayutsya immunologicheskihpokazateley studirao (tabele X - prosečna veličina, D - standartnoeotklonenie).

Tabela 1. Neki pokazatelji imunološkog statusa na bolnyhhronicheskim toksoplazmoza tokom akutne bolesti

* - p<0,05, ** - p<0,01 (сравнение с контрольной группой).

Dakle, bez obzira na nedostatak pouzdanih statističkih razlichiyu pacijenata sa cikličnim tok bolesti u odnosu na rekurentne, na prvi primetio značajno veći sadržaj CD-8 + neskolkobolshee broj B-limfocita koji proizvode Ig G (u daljnjem tekstu - B-IgG +). Također su povećane koncentracije specifičnih Ig G (u daljnjem tekstu Ig G Tox), IFN-čin, IFNa-Acti IL-4. Također primjećuje odsustvo IFNG-čin, to je niža koncentracija IFNG-Društvo ipokazatelya RTML.

U poređenju sa pokazateljima imunološkog statusa sa formeHT latentni period od egzacerbacije (reaktivacije) u toku cikličnog harakterizuetsyastatisticheski značajan porast količine CD-8 +, IFNa-čin (p<0,05), снижением количества B-Ig G+ (p<0,05), общегоIFN-g (p<0,01) и Ig G tox (p>0,05), а также ростоминдекса РТМЛ (на 15 %). У пациентов данной группы не обнаруживалсяв сыворотке крови активный IFN-g (как и при латентном токсоплазмозе).

Imuni sistem kod akutnih bolesnika sretsidiviruyuschim tokom hemoterapije karakteriše manji vyrazhennymuvelicheniem broj CD-8 + (p<0,05) и активного IFN-акт (p>0,05),более заметным снижением количества B-Ig G+, Ig G tox, IFN-a-čin (p<0,05), наличием в сыворотке IFN-G-čin, oštar pad u rast IL-4 i RTML od 28%.

Tabela 2. Neki pokazatelji imunološkog statusa na bolnyhhronicheskim toksoplazmoza nakon toksoplazminom tretmana

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ)

Tabela 3. Neki pokazatelji imunološkog statusa toksoplazmoza bolnyhhronicheskim 1 mjesec nakon tretmana.

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ).

Tabela 4. Neki pokazatelji imunološkog statusa na bolnyhhronicheskim toksoplazmoza 3-6 mjeseca nakon tretmana.

* - p<0,05 (сравнение с контрольной группой), * - p<0,05(сравнение между группами с циклическим и рецидивирующим течениемХТ)

Analiza podataka u tabelama 2-4 pokazuje da, zajedno sa zajedničkim grupe pacijenata dlyaobeih HT mijenja imunološki sistem nablyudalissuschestvennye studirao razlike u dinamici pokazatelja narastayuschievo vremena.

Odmah nakon što je za imunitet u svim patsientovnablyudali rast IFNG-čin, IL-4 (boleevyrazhenny pod cikličnim tok bolesti), smanjenje CD-4 + 8 + -iCD. Međutim, ako je ciklični tok bolesti CD-4 + snizhalisna 5%, i CD-8 + - 11%, kada relapsno naravno zaregistrirovanaobratnaya trend: CD-4 + su smanjeni za 25%, a CD-8 + - 10% .Ovih promjene su u pratnji višesmjerne dinamika IFN-g-društvo: njegova koncentracija se povećava za 85% pritsiklicheskom tokom HT-a i smanjen je za 38% u bolesnika sa retsidiviruyuscheyformoy bolesti.

U roku od mjesec ispitivanih bolesnika grupne dinamike pokazateleyIS steći više razlike. U ciklični tok bolezniprodolzhalsya jasno (40-120%) povećanje koncentracije IFN-g-IFN i činG-Društvo, vozrastalokolichestvo CD-4 + na vrijednost prelazi periodu egzacerbacije, nablyudalosdalneyshee smanjenje broja CD-8 +, pokazali su pad IL-4. U isto vrijeme, u bolesnika s relapsno rast hemoterapija CD-4 + pratnji značajno povećanje od CD-8 + (30%). Neznachitelnyyrost koncentracija IFN-g-ukupno (1%) od ovih pacijenata je bio povezan sa uvelicheniemkontsentratsii "aktivan" oblici IFN (njihova vrijednost porasla za 10%).

Pacijenti obe grupe uočena jednosmjerni dinamikakontsentratsy B-Ig G + i Ig G tox (smanjenje broja limfocita, produtsiruyuschihIg G i koncentracije specifičnih imunoglobulina).

Posebno treba izdvojiti su rezultati kompleksnih (klinička i imunološke) ispitivanje pacijenata u roku od 3-6 mjeseci nakon tretmana.

Rezultati ankete pacijenata manifestne oblike HT cherez6 mjeseci nakon terapije pokazuju da

1. Kada biciklizam tok bolesti (jednokratni Naravno terapiiprivodit stabilne remisije bolesti - prelazak bolest vhronicheskuyu latentni oblik), postoji gotovo potpuna klinicheskayaremissiya - nestati žalbe manifestacije pobjedi retikuloendotelialnoysistemy pronađena tela socijalnoj adaptaciji pacijenata.
2. Dinamika kliničkih manifestacija hemoterapije u direktnoj korelaciji sa rostomCD-4 +, IFNG-čin (pozitivno) i indeks vyrazhennymsnizheniem RTML sa toksoplazminom (negativno). RostuCD-4 + odgovara proporcionalno povećanje količine CD-8 +, povećava koncentracija imunoglobulina G Tox. Većina proučavao immunologicheskihpokazateley ne razlikuju od onih u latentni oblik kemoterapije.
3. Relapsno naravno manifestuju oblika HT-a u ovim uslovima obsledovaniyaharakterizuetsya zadržavanje disadaptative reakcije (smanjenje radne sposobnosti, izrazio je emocionalna nestabilnost, postoje objektivni priznakiotsutstviya remisije), oštar porast u broju CD-8 + povtornymuvelicheniem indeks RTML antigene Toxoplasma, snizheniemkontsentratsii Ig G Tox, niske koncentracije aktivne interferona .

rasprava

Istraživanja su pokazala da imunološki procesi koji doprinose kliničke manifestacije reaktivacije hemoterapije harakterizuyutsyaopredelennymi razlike kod pacijenata sa upornim polozhitelnymeffektom imuni i bolesnika s relapsno oblika dannoyklinicheskoy bolesti.

U kombinaciji sa dostupnim podacima do danas, u literaturi, rezultati vlastitih istraživanja omogućuju nam da ponudimo obyasnenienekotoryh manifestacija infekcije stečene toksoplazmoza.

Poznato je da je glavni element latentnogotoksoplazmoza spriječiti reaktivacije je sinteza visokog nivoa IFN-g, koji sprečava razgradnju ciste. Ovo yavlenieizucheno eksperimenata [6]. Također je pokazala da kada latentnomtoksoplazmoze specifične CD-4 + luče i IFNG,i IL-4, koji je karakterističan za Th0 ćelija [9].

U nekim studijama bilo je eksperimentalno dokazano da infitsirovaniemakrofagov Toxoplasma dovodi do smanjenja ekspresije MHC-II molekulklassa i IFN-g-ovisna prezentacija MHC-I, mozhetyavlyatsya da je jedan od faktora koji određuju upornost vozbuditelya.Takzhe pokazuje da reaktiviranje latentne infekcije u eksperimentevazhnaya ulogu CD-8 +, koji lysed infitsirovannuyukletku, ali sebe ne uništi Toxoplasma [4,8].

mehanizam HT oštrenje može se predstaviti na sljedeći način obrazom.Na razvoju pozadini imunosupresija smanjena koncentracija IFNG(Kao rezultat direktne inhibitorne aktivnosti ili sinteza rezultateistoscheniya). Smanjena IFN-g može dovesti do spetsificheskihTh0 transformacije u Th2, što dovodi do vrha citolize ćelija infitsirovannyhtoksoplazmami (pseudociste). Dolazni extracellularly prostranstvoparazity djelomično lysed specifična antitijela u prisutstviekomplementa. Dio patogena podvrgnuti fagocitozu, nosyaschemunezavershenny karakter. Unutar patogena oblika sobstvennuyuobolochku ćelije, inhibira funkciju antigen-predstavljanje i na taj način stvara uvjete za njegovo očuvanje, jer, čak u ćelijama sluchaelizisa on ostaje živ. Ovaj proces je podržan zaschet hronični nedostatak IFNG. Mogući reverzibilnost Uslovi imunodeficijencije spontane remisije, ako je koncentracija IFNG povećanje, iimmunny odgovor će biti implementiran od strane Th1-tip. U slučaju uglubleniyaimmunodefitsita (AIDS) Th1-kontrola je potpuno izgubljen, zaštita funktsiyunespetsificheskoy pretpostaviti neutrofili i aktiviruetsyaTh2 odgovor. Kao rezultat toga, u razvoju poliklonalna aktivacija B-limfotsitovs hiperprodukcije nespecifični antitijela, što dovodi do razvojne generalizatsiiinfektsii parazitskim sepse (meningoencefalitis, apscesi, upala pluća, hepatitis, miokarditis, itd).

U većini slučajeva (90%) toksoplazminom služi kao spetsificheskogoimmunomodulyatora, čiji je mehanizam djelovanja je vjerovatno svyazans aktiviranje proizvode IFN-g specifične CD-4 +. U ovom mehanizmasvidetelstvuyut pogoduju rastu CD-4 + i koncentracije IFNG,i odsustvo značajnih dinamike humoralnog zvenaimmuniteta. Antigen se daje intradermalno vjerojatno sorbiruetsyana ćelije antigen predstavlja kože, obrađene i predstavlyaetsyaya-helper ćelija, koje reagiraju na to generacija IFN-g dopolnitelnogokolichestva. S druge strane, IFNGstimulirana Th0 transformacije u Th1. Tako prekraschaetsyatsitoliz inficirane ćelije sa pseudociste već formirane, au nedostatku potonje nalazi intraćelijski toksoplazmyunichtozhayutsya uskoro IFNG makrofaga.

Oko 10% slučajeva ne dovodi u uvodu toksoplazminom krazvitiyu stabilna remisija. Relativno visoka inicijalna urovniIFN-G (Uključujući aktivne IFN-g) mogu odražavati činjenicu da ovi pacijenti otsutstvuettochka svoje aplikacije (ne izražava receptora). Snizheniekolichestva CD-4 + i IFNG dopolnitelnoyantigennoy o opterećenju pozadini, kasniji rast CD-8 + hronicheskihvirusnyh tipično za infekcije (npr hroničnih virusnih hepatitisa). Međutim, ovaj slučaj je nepotpuna karakter citolize i mikrobitsidnayaaktivnost makrofaga, vjerojatno ne povećava.

Sposobnost imunoloških ćelija na sintezu IFN-g pod utjecajem specifičnih antigena stimulyatsiiopredelyaet i prognoza dalji tok kemoterapije. Ispostavilo se da uvseh bez izuzetka, pacijenti sa cikličnim tok bolesti, 4 nedelje nakon tretmana, nivo ukupnog toksoplazminom IFNGpremašili original, dok je u periodične HTV u to vrijeme koncentracije ukupnog IFNG80% pacijenata smanjio.

Očigledno je da interferon igra važnu ulogu u procesu reaktivatsiilatentnogo toksoplazmoza. Mehanizam relapsa kemoterapije, vjerojatno teže, što potvrđuju korelaciju dinamike klinički pokazatelji proyavleniys RTML sa Toxoplasma antigene. RTML yavlyaetsyaintegrativnym indeks odražava immunokompetentnyhkletok interakciju s citokine proizvodi njih ima mnogoobraznymiodno- i višesmjerne biološke efekte. Jasno polozhitelnayadinamika pacijenata sa stabilnom bolesti u tranziciji remissiyui ponovno pojavljivanje akutnih simptoma u drugim kategoriipatsientov vremenski podudara sa očigledne razlike pokazatelyaRTML. Nakon 3-6 mjeseci nakon tretmana, sensibilizatsiisnizhaetsya u prvoj grupi i povećava u drugom.

nalazi

1. U patogenezi akutnog pogoršanja kroničnog toksoplazmoza chelovekaodnim od vodećih faktora za smanjenje razine IFN-g i pripadajuće aktiviranje Th2 odgovora.
2. U 90% dodatne količine antigena sa vnutrikozhnomvvedenii toksoplazminom dovodi do stimulacije IFNG,mikrobicidnu aktiviranje mehanizama makrofaga prestanka tsitotoksicheskiheffektov, vratiti tolerancije i transformacije zabolevaniyav latentni oblik kroz uključivanje Th1 odgovora.
3. Znatno manje (10%) specifičnih antigena nagruzkane dovodi do uključivanja Th1 odgovora, koji može biti svyazanos genetskih defekata kao što su proizvodnja IFN-g, i mehanizmi za implementaciju to biologicheskiheffektov.
4. Toksoplazminom (Toxoplasma antigen kompleksa) je spetsificheskimimmunomodulyatorom, glavni mehanizam djelovanja je stimulacija sinteze svyazanso IFN-g proliferaciju antigen-specifičnih T-helperov1 prvog tipa.

reference

1. Lobzin JV, Bulankov Yu Kazancev AP, Vasiljev V.V.Hronichesky toksoplazmoza: racionalna terapija. / Rossiyskiemeditsinskie olova. Naučni časopis za klinitsistov.- 1997. - N 2.- t 2 -. Sa. 67-69
2. Beazley D.M., Egerman R., S. Toksoplazmoza // Semin. Perinatol. 1998. godine. -Vol. 22, № 4. -P. 332-8.
3. Bossi P., Caumes E., Astagneau P., Li T.Š., Pariz L., MengualX., Katlama C., Bricaire F. Caracteristiques epidemiologiquesdes toxoplasmoses cerebrales chez 399 pacijenata infectes parle VIH Suivis entre 1983 et 1994 / Rev. Med. Interne. 1998. maj--Vol.19, №5. -P. 313-7
4. Darrel O., Ho-jena, Alex W.L. Joss. Ljudski toksoplazmoza. -New-York University Press, 1992. - 432 str.
5. Denkers E.Y., Gazzinelli R.T. Regulacije i funkcija T-cell-mediatedimmunity tokom Toxoplasma gondii infekcije / Clin. Microbiol.Rev. -1998. -Vol. 11, №4. -P. 569-88
6. Lovac C.A., Subauste C.S., Remington J.Š. Uloga cytokinesin toksoplazmoze / bioterapije. -1994., -Vol.7, №№3-4. -P. 237-47
7. Isaac-Renton J., Bowie W.R., King A., Irwin G.S., Ong C.S., Fung č.p., Shokeir M.O., Dubey J.P. Otkrivanje Toxoplasmagondii oocisti u vodi za piće / Appl.Environ. Microbiol. -1998. -Vol.64, №6. -P. 2278-80
8. Luder C.G., Lang T., Beuerle B., bruto U. Down-regulationof MHC klase II molekula i nemogućnost da se regulišu klasi molekula u mišje makrofagima nakon infekcije sa Toxoplasmagondii / Clin. Exp. Immunol. -1998., Vol. 112, №2. -P. 308-16
9. Prigione I., Facchetti P., Ghiotto F., Tasso P., Pistoia V.Toxoplasma gondii-specifične CD4 + T-ćelija klonove od zdravih, latentno inficiranih ljudi prikazati Th0 profil citokina sekrecije / Eur. J. Immunol. -1995. -Vol. 25, №5. -P. 1298-305