Određivanje aktivnosti proteina C sistem sa

Gen odgovoran za sintezu proteina C, lokalizovan na kromosom 2 (ql3-ql4). Glavna funkcija ovog fiziološki antikoagulans je glavni neenzimski inaktivacije faktora zgrušavanja (AHV, FVIlla).

Video: Uređaj za uklanjanje toksina iz organizma

Pacijenti sa urođenim nedostatak proteina C, postoji tendencija da se ponavlja tromboze i tromboembolije. Nedostatak proteina C je naslijedila autozomno, homozigota i dvostruko heterozigota umre u ranom djetinjstvu od tromboze.

Princip metode

Metoda se zasniva na procjeni aPTT mješavina (razrijeđen uzorak BTP, protein C manjkav plazme, protein C aktivator je APTT reagens). Protein C aktivira PRP test uzorak reagens pripremljen otrovnica zmijskog otrova iz Agkistrodon contortrix. Aktivirani protein C koagulacije uništava faktora Va i Villa, koji se nalaze u ispitivanom uzorku preparata i dodao protein C-manjkav plazme, čime se produžava od aPTT je snimljena nakon dodavanja kalcijum hlorida. Na niskim aktivnosti proteina C je izražena blago produženje APTT. Razrjeđenja kalibraciju uzorak BTP omogućuju krivu i da se utvrdi aktivnost proteina C.

Video: azot oksida (NO)

Reagensa i opreme

• Protein C aktivator (Protac).
• APTT reagens.
• Manjak proteina C u plazmi.
• Rastvor kalcijum hlorida (0.025 M).
• Buffer rješenje.
• PRP uzorak s poznatim aktivnost proteina C.
• Koagulometar.

Uzorci krvi za istraživanje

Da bi se odredila aktivnost proteina C se koristi BTP.

Dalje nepripremljeni uzoraka kalibracije i test uzorak razrijediti s pufera u omjeru 1:10.

Evaluacija rezultata studije

Za konstrukciju krivulje kalibracije zahtijeva BTP uzorku od poznatih aktivnost proteina S. za izgradnju krivulje kalibracije pomoću vrijeme zgrušavanja u sekundama, dobijenih u proučavanje razrijeđen uzoraka kalibracije sa poznatim aktivnost proteina C.

Tumačenje rezultata ankete

Klinička slika kongenitalne nedostatak proteina C dominira ponavljaju venske tromboze i tromboembolije. Jedan broj pacijenata oboljelih od kožnih nekroze, pobačaj, i dr. U novorođenčadi sa nedostatkom proteina C se često posmatra malignih purpura (purpura fulminans).

Stečena nedostatak proteina C može biti zbog neadekvatne sinteze hepatocita, povećana potrošnja zbog motora sa unutrašnjim sagorijevanjem, tretman sa indirektnim antikoagulansima i dr. Neki pacijenti sa VA poštovati precjenjivanje svoje aktivnosti.

Uzroci grešaka

• Greške predanalitički fazi studije.
• Kontakt sa heparin proučavao krv iz venski kateter.

Ostale analitičke tehnike

Funkcionalnu aktivnost proteina C amidolytic izabere ili koagulacije procedura.

Video: D. Mavrodi Predavanje # 3 "Uloga lučenje sistema treće vrste proteina u ..."

Da bi se odredila koncentracija proteina C pomoću ELISA, međutim, kada se uporede rezultati imunološke i funkcionalne tehnike neuskladjenost rezultate kod pacijenata s molekularnim abnormalnostima proteina C.

Protein S aktivnost

Protein S - vitamin K-ovisna glikoprotein uključena kao ne-enzimski kofaktor aktivirani protein C proteolitičke razgradnje Va i Villa faktora koagulacije. Gen odgovoran za sintezu proteina S, nalazi se na kromosom 3 u ljudskom položaju pll.l-qll.2. Protein S u krvi je dostupan u dvije verzije: kao slobodni protein (oko 40%), i kao povezane sa S4-komponentu komplementa (oko 60%). Smanjenje proteina S aktivnost povećava rizik od tromboze i tromboembolije.

Princip metode

Funkcionalne tehnike se zasnivaju na registrovanih ozbiljnosti prekovremeno mješavina zgrušavanje proteina S manjkav plazmi i plazmi studirao kada se primjenjuje u aktivirani protein C. test sistema za procjenu vrijeme zgrušavanja na sličan test sistem proizvođači koriste različite koagulacije stimulansi (Russell zmijskog otrova, APTT reagens uskoro koagulacije faktor IX ili dr.). U normalnim proteina S pod uticajem aktivirani protein C uzrokuje značajno produžava vrijeme zgrušavanja (zbog uništavanja nonenzymatic faktora koagulacije), dok nedostatak proteina S izražava mnogo slabiji (zbog neefikasne uništavanja nonenzymatic faktori aktivirani protein C).

Reagensa i opreme

• Protein S manjkav plazme.
• Aktiviranje reagens (fosfolipidi, Russell zmijskog otrova ili drugih aktivatora, heparin neutralizator, itd).
• Aktivirani protein C.
• Rastvor kalcijum hlorida (0.025 M).
• Buffer rješenje.
• PRP uzorak s poznatim sadržajem proteina S.
• Koagulometar.

Uzorci krvi za istraživanje kako bi se utvrdilo je aktivnost proteina S pomoću JPP.

Dalje, mješavina je pripremio i istražiti BTP uzoraka pufera su razrijeđen 1:10.

Metode određivanja

Tokom određivanja proteina S aktivnost značajno varira pomoću reagensa i opreme različitih proizvođača, tako da je akcija sekvence laboratorija liječnik mora strogo pridržavati uputstva za reagensa komplet i prilagoditi ga postojećih laboratorija u koagulometar.

Evaluacija rezultata studije

Studija koagulacije put razrijediti PRP uzorke sa poznatim koncentracija proteina S omogućava da se izgradi krivu kalibracije za određivanje aktivnost ove fiziološke antikoagulansa posto normalno.

Kod zdravih ljudi, aktivnost proteina S u rasponu od 60-130%.

Tumačenje rezultata ankete

Kongenitalna nedostatak proteina S - rijedak kvar antikoagulans hemostaze. Prvi opis nedostatka proteina S uvedena je 1984. godine NR Schwarz na al. Klinička slika bolesti dominiraju ponavljaju phlebothrombosis i tromboembolije. Kao i mnoge druge nedostatke antikoagulans hemostaze, ova patologija se prenosi autosomno. Razlikovati tri vrste urođene nedostatak proteina S.

Opcije nedostatak kongenitalne protein S

• Tip: I Koalicija način: Snizhen- Free Protein S: Protein Ukupno Snizhen- S Smanjeno.
• Tip: II Koalicija način: Snizhen- Free Protein S: Normalizacija ukupnih proteina S: Norm.
• Tip: III Koalicija način: Snizhen- Free Protein S: Protein Ukupno Snizhen- S: Norm.

Tip I se odlikuje niskim sadržajem proteina S pomoću različitih oličenje njihove imunološke odlučnost, kao i smanjiti svoje funkcionalne aktivnosti. Tip II deficijencije poštovati smanjenje funkcionalne aktivnosti, međutim, ukupni i slobodni protein S frakcija nije prekršila. Tip III prikazan je u kombinaciji smanjenje funkcionalne aktivnosti slobodnog proteina S i njegove frakcije. Dakle, da se identifikuje tip nedostatka proteina S je potrebno koristiti koagulacije i imunološke metode za određivanje to.

U kliničkoj praksi je mnogo češća stekao nedostatak proteina S. smanjena aktivnost proteina S mogu se naći u nefrotski sindrom, trudnoće, estrogena terapija, L-Asparaginase, i dr. U novorođenčadi sa nedostatkom proteina S poštovati malignih purpura (purpura fulminans).

Uzroci grešaka

• Heparin iz venski kateter.
• Hemolize u ispitivanom uzorku krvi.
• Nepravilno doziranje citrata prilikom snimanja krvi.

Drugih analitičkih tehnika prilično raširena metoda zasnovana na upotrebi ELISA za određivanje slobodnog proteina S i S4 u vezi sa komponenta komplementa. Također je opisao (ali ne i na tržištu) funkcionalna metoda određivanja ovog antikoagulansa, baziran na upotrebi hromogene supstrate.