D-dimer: ono što je norma

Djelovanje enzima kompleksa t-PA-plazminogena proizvodi enzim sposoban da uništi fibrinskog ugruška, - plazmin. Tokom degradacija fibrina, koje ovaj ključni enzim u fibrinolitičkom sistem protofibrils (-D = D-E-D = D-E-D = D-) su odvojene D-dimera (-D = D-) i E fragmenata (-E-). Od D-dimera su D-D-veze (cross-linking), koji su odsutni u fibrinogena, fibrin monomera i labave fibrina polimera, povećava njegova koncentracija u krvi ukazuje na ostvarenje aktivacije koagulacije i fibrinolize.

Princip metode

Princip ELISA metoda se zasniva na specifičnim vezivanje D-dimera monoklonskih antitijela na površini mikroploče. Nakon uklanjanja supstance koje nisu vezani za mikroploča, inkubirani sa enzim-označeni antitijela (konjugirana). Kao rezultat toga, na površini mikroploča javlja pristupanju antitijela označeni enzim kompleksa na postojeći D-dimer-anti-O-dimera. Dodano nakon pranja 3,3`, 5,5`-tetramethylbenzidine omogućava da se ocijeniti aktivnost enzima karakterističnim obojenosti testa smjese. intenzitet boje je proporcionalna aktivnosti enzima i, shodno tome, količina analita u uzorku.

Reagensa i opreme

• Enzim konjugata (zec ili koza antitijela konjugirana na hrena peroksidaze).
• U mikroploča obložene anti-D-dimer rupu.
• Kalibrator / kalibratori.
• Uzorak tampon.
• Wash Buffer.
• A rješenje hromogena / podloge (hromogena - tetramethylbenzidine, podloge - vodikov peroksid).
• Zaustavljanje rješenje (0,5 M sumporna kiselina).
• Oprema za izvođenje ELISA (pranje suđa, čitač za tablete i druge.).

Distributer dijagnostički kit reagensa - CJSC "BIOHIMMAK".

Uzorci krvi za istraživanje

Kao uzorak za određivanje koncentracije D-dimera, korištenje stabiliziran plazme natrijev citrat krvi. Karakteristike priprema uzoraka detaljno analizirati u Dodatku 3.

Video: Povećanje D-Dimer sa IVF (? Da li e-dimer implantacija)

Metode određivanja

Reagensi uključeni u kompletu, a ploča prije testa treba da bude na sobnoj temperaturi. Slijed akcija laboratorije ljekar u određivanju nivoa D-dimera mora striktno u skladu sa uputstvima reagens komplet.

Video: Express analizator srčani markeri i D-dimer RAMPA Reader

Rezultati evaluacije studije za mjerenje potrebno je koncentracija D-dimer za korištenje krivu kalibracije. Kalibratora u duplikatu se preporučuje da istraži definicije, kao i izgradnju nove kalibracije kriva za svaki novi dijagnostički kit. Za konstrukciju krivulje kalibracije pomoću vrijednosti apsorbancije dobijene u otkrivanju različitih koncentracija D-dimera.

Treba naglasiti da je u vrijeme pisanja ovog teksta monografije univerzalno prihvaćeni standard D-dimera, tako da proizvođači koriste različite dijagnostičkih kitova i uzoraka jedinice za njegovo određivanje. Pored tradicionalnih sadržaj indikacije težina po jedinici volumena (mg / L ng / mL, ug / ml, mg / l, nmol / l), a broj proizvođača dijagnostičke sugestija kompleta određivanja D-dimer ocjenjuje u jedinicama ekvivalent fibrinogena (FEU mg / L).

Video: podmazivanje zupčanika brusilica (LBM)

Ova funkcija je vrlo važno pitanje, jer u različitim oličenje predstavljanja rezultata istraživanja pojavljuje koncentracije (mg / ml), i normalnog opsega i rezultate za određivanje različitih mjernih jedinica razlikuju za oko 2 puta. Često, zbog nedostatka jedinstvenih standarda, razlike u pozadini mnogih patoloških stanja (DIC, plućna embolija i nekoliko drugih) kada se koriste različite opcije za izražavanje rezultati se razlikuju za više od 2 puta.

Formula za izračunavanje rezultata određivanje koncentracije D-dimera u SI jedinicama: [nmol / l] = [.mu.g / ml] x 5.476. Najčešće se koristi jedinice težina odgovaraju jedni druge kako slijedi: 250 ng / ml = 0,25 ug / ml = 0,25 mg / L = 250 g / l.

Normalnog raspona koncentracija D-dimera treba odrediti u svakom laboratoriju sa karakteristikama opreme i potrošnog materijala. Normalne vrijednosti D-dimera, odredi većina proizvođača je manje od 250 mg / L, manje od 0,5 mg / l FEU. S obzirom da je poluživot D-dimer je više od 24 sata, nivo je stabilan dovoljno dugo.

Evaluacija rezultata testa treba izvršiti uzimajući u obzir definiciju ispravnosti. Za kontrolu kvaliteta svakog laboratorija za kontrolu predložio da koriste materijale s jedinicama preporučuje proizvođač.

Tumačenje rezultata ankete

Određivanje koncentracije D-dimera se često koristi za detekciju tromboze i tromboembolije. Specifičnost ovog indeksa u odnosu na tromboze poremećaja je ograničen jer ovaj indeks raste, i na mnogim drugim patološkim stanjima.

Uprkos ograničenim specifičnost testa, to je vrlo visok informacije tromboze sadržaja i tromboembolije, jer test pokazuje vrlo dobru negativan prognostički nivou, odnosno. E. rezultat negativan test je gotovo uvijek govori o nedostatku tromboembolijskih procesa.

Visok nivo D-dimera treba tumačiti uzimajući u obzir rezultate drugih testova i kliničkih bolesti. Ovaj indeks se koristi za procjenu antitrombotiåna efikasnost terapije.

Ostale analitičke tehnike Pored toga ELISA, za određivanje D-dimera koriste i druge imunohemijska tehnike (immunoturbidimetry, immunohemilyuminestsentsiya, lateks aglutinacije, imunohromatografski, membrana immunodiffusion). Na tržištu su široko predstavljeni semikvantitativnog metoda određivanja to. Mnogi moderni modeli automatskih i poluautomatskih koagulometri stanju kvantificirati nivo D-dimera koristeći immunoturbidimetry.

Uzroci grešaka

• Nepoštovanje režim temperatura skladištenja.
• Povreda postupka pranja (za ručno pranje treba oprati barem 3-4 puta). Nakon pranja ploče odvoda na filter papir kao tečnost, obično ostaje u bunarima nakon pranja, može ometati donje podloge i optičke gustine uzorka.
• Miješanje reagensa iz različitih mjesta.
• Kondenzaciju unutar bunara. Da biste spriječili pojavu kondenzacije ne bi trebalo da otvori paket do tada, sve dok se ne zagrije na sobnu temperaturu.