Fagocitne aktivnost dendritičke stanice. Imunofenotip od dendritičke stanice

dendritičke stanice, izveden iz ćelija koštane srži miševa su testirani na sposobnost fagocitoze. Fagocitnu aktivnost DC u različitim fazama diferencijacije, uskoro Immunovac-PE-4, kao i klasične induktor ACO sazrijevanja TNF-a, je ocijenjena za upijanja protiv sojeva S. aureus i S. typhimurium. Kao kontrola, korišteni su makrofagi koji su pripremljeni iz istog ćelija koštane srži ih kultivacije s GM-CSF za 7 dana.
Nezrele dendritičke stanice aktivnije phagocytosed bakterija za razliku od DC tretira Immunovac-VP-4, ACO i TNF-a.

Fagocitnu aktivnost makrofaga i dendritičke stanice je studirao u dinamici protiv S. aureus i S. typhimurium.
Najaktivniji su makrofagi, fagocitne ih indeks u odnosu na S. aureus nakon 30 minuta inkubacije je 86,0 ± 4,8%, a ona je ostala na visokom nivou za tri sata posmatranja.

fagocitne aktivnost nezrele DC stimulirana i imunomodulatori mikrobiološkog porijekla bili značajno različiti.
Kada se dodaje u srijeda kultivacije TNF-a ili Immunovac-VI-4 (grupe 2 i 3), fagocitnu aktivnost bila je značajno niža, uz dodatak Immunovac-VP-4 indeks fagocitne je nešto veći nego u slučaju pod utjecajem DC sazrijevanje TNF-a. Pod uticajem SOA također pokazuje smanjenje fagocitoze okružnih, ali je nivo bio veći od Immunovac-VP-4, koji mogu ukazati na prisutnost u kulturi nezrelih okružnih i makrofaga. Kada se uporede stepen fagocitoze S. aureus i S. Ty-phimurium značajne razlike nije pronađeno.

dobro vjerovatno, da je veća aktivnost bakterija apsorpcije dendritičke stanice stimulirana Immunovac-VP-4 i ACO izraz zbog Toll-like receptora na okružnim i makrofaga koji imaju afinitet za objekte patogena povezane bakterija. Nakon reakcije sa bakterijskom proizvodima, DC prebačen u novu funkcionalnu državu, koja se ogleda u smanjenju fagocitnu aktivnosti i sposobnost da se više sjajne prezentacije antigena u odnosu na makrofaga.

studija immunophenotypic karakteristike dendritičke stanice u različitim fazama sazrijevanja su izvršena pomoću flyuorestseinizotiotsianat i PE-označeni monoklonskih antitijela kompanija, SAD «Caltag».

Stepen diferencijacije i zrele dendritičke stanice, izveden iz embrionalnih miša ćelija jetre je određena promjena u razini ekspresije diferencijacije molekula CD34, CD38, CD40, CD80, CD86, CD83, F4 / 80, MHC I, MHC II nakon 3 dana nakon toga na nezreli dendritičke stanice Immunovac-VP-4, bakterijski lizat K. pneumoniae, ili TNF-a.

nalazi šou da TNF-a i Immunovac-VP-4 u proučavao koncentracije stimulirana DC sazrijevanja. Međutim, sudeći po izrazu diferencijacije markera, TNF-a aktivira DC sazrijevanje u većoj mjeri nego Immunovac-VP-4 i lizat K. pneumoniae. Koncentracija 25 ug / ml Immunovac-PE-4 je bio optimalan za indukciju DK dospijevaju pod ovim uvjetima razinu ekspresije kostimulatornu molekula bila veća. Međutim, izraz F4 / 80 molekula na okružnim stimulirana Immunovac-VP-4 i lizat K. pneumoniae, ostao je povišen (23,8 ± 2,6% i 21,2 ± 3,4%, respektivno) u odnosu na DC, tretirana TNF-a (0,6 ± 0,2%).

Također je istražen Imunofenotip od dendritičke stanice, izveden iz ćelija koštane srži miševa. Kao sazrijevanje induktori koristi imunomodulatori bakterijskog porijekla - Immunovac-VP-4 GMDP, ASO, a kao kontrola - lizat LPS i K. pneumoniae, i TNF-a.

Aktiviranje ćelija preko Immunovac-VI-4 GMDP i dovodi do sazrevanja ćelija. Povećava izraz kostimulatornu molekula, CD38 prianjanje molekula. Tako je koncentracija koje se koriste Immunovac-PE-4 imao različite efekte na nivou MHC. U dozi od 25 ug / ml MHC I izražavanja sam bila 2,7 puta veća nego u koncentraciji od 50 ug / ml. MHC II izraz bio visok na obe doze i nije imao značajne razlike. GMDP povećan sadržaj DC izražavanje MHC klase II.

korištenje lizat K. pneumoniae i LPS poboljšane nivoa ekspresije kostimulatornu molekula MHC molekule predstavljaju antigene I i II.

Kada koristite ACO kao induktor DC markera sazrijevanja CD34 izraz je doživjela značajne promjene u funkciji doze. Njegova dinamika posmatra samo na najvišim dozama. U primjeni ARF u dozi od 0,3 EU / ml povećanjem CD80 sadržaj, CD86, MHC I-izražavajući ćelija. Međutim, nivo CD86 bio manji nego kod drugih induktora sazrijevanja. Izraz markera F4 / 80 DC stimulirana Immunovac-VI-4 mogu biti povezani sa prisustvom bakterijskih LPS u vakcine. Ovi rezultati potvrđuju sposobnost okružnih dobiti prethodno tretirane sa LPS, express antigena ne samo zrele DC, ali i receptore za LPS.

sljedeće eksperimenti Proučavali smo izražavanje ovih markera u kombinaciji immmunomodulyatorov mikroba porijekla (IMMP) sa TNF-a. Uzgoj DC u prisustvu GM-CSF i IL-4 uz dodatak na šesti dan 2,5 ng / ml TNF-a i IMMP DC sazrijevanje stimulirana u većoj mjeri nego doza TNF-a, kao i smanjenje održavanje u kulturi makrofaga. Sama po sebi, TNF-a u koncentraciji od 2,5 ng / ml (grupa 3) nije izazivati ​​DC sazrijevanje u odnosu na kontrolu (Grupa 2), CD34 nezrele marker je bio 5 puta veći, F4 / 80-11,4 puta, to sugeriše da postoji značajan interes u kulturi makrofaga. Međutim, kada koinkubatsii 2,5 ng / ml TNF-a izraz došlo sa imunomodulatora povećati CD38 prianjanje molekula, kostimulatornu molekule CD40, CD80, CD86 i MHC I i II klase.

posebno to se odnosi na ASO, koinkubatsiya jer s TNF-a stimulirana izraz površinskih markera specifičnih za DC. To smanjuje marker CD34 u odnosu na nezrele DC (grupa 1) za 3,4 puta, povećana ekspresija adhezije molekula CD38 3,2 puta, kostimulatornu molekule CD40 38 puta, CD80 i CD86 gotovo 9 puta, MHC I 2 7 i MHC II 1,5 puta, nivo makrofaga markera smanjen je za 3,6 puta. Nakon ulaska u kulturi, srednji TNF-a i Immunovac-VI-4 je također pronađena efekt stimulacije, izražavajući koji značajno povećava ekspresiju MHC I i II i smanjenim sadržajem F4 / 80 u odnosu na akciju Immunovac-VI-4 u istoj dozi (Tabela. 7). Slični rezultati su dobijeni sa kombinacijom TNF-a (2,5 ng / ml) i GMDP, ali izraz CD40, CD80, CD86 i MHC II je bio veći u slučaju kombinacije TNF-a i Immunovac-VP-4.
nalazi šou, da je uvod u medij kulture male količine TNF-a povećava potencijal DC sazrijevanja pod uticajem imunomodulatori mikrobiološkog porijekla.