Kortizol i nadbubrežnih androgena u krvi

Poluživot u plazmi kortizol (60-90 minuta) ovisi o stupnju vezivanja za proteine ​​i metabolizam stopa.

Vezivanje proteina plazme

Kada ubrizgava u kortizola u krvi i nadbubrežne androgena vezuju za proteine ​​plazme. Kortizol interakciju prvenstveno sa kortikosteroidima-vezujući globulin (CBG ili Transkortin) iu manjoj mjeri - s albumin, dok androgena - uglavnom za albumin. Vezani biološki neaktivan steroidima. Aktivan samo nevezani ili slobodni, njihove frakcije. kortizol proteine ​​plazme zaštiti od propadanja i glatko nagle oscilacije nivoa u epizodnim emisije iz nadbubrežne žlijezde. Pljuvačke vezujući proteini nedostaje, a samim tim i nivo kortizola u njemu odražava koncentraciju svojoj slobodnoj formi u krvi.

Slobodni i konjugovanog kortizola

Bazalnom besplatno kortizola uvjete objašnjava u plazmi oko 10%, udio u vezi sa DRG - oko 75%, a ostatak - udio u vezi sa albumin. free kortizola koncentracije u plazmi je oko 1 ug%, a taj nivo je aktivan hormon je regulisano ACTH.

Kortikosteroid-binding globulin (CBG)
DRG (molekularne težine oko 50.000) proizvodi u jetri i ima visok afinitet za kortizol. Sadržane u 100 ml DRG plazme veže oko 25 ug kortizola. Kada je ukupna koncentracija kortizola u plazmi prelazi taj nivo, koncentracija svojoj slobodnoj formi ubrzano raste. Drugih endogenih steroida obično ne utječu na vezivanje kortizola CBG. Izuzetak je progesteron u kasnoj trudnoći, kada to može potrajati i do 25% od vezivanja GSB. Sintetičkih steroida (osim prednizolon) sa GSB teško komunicira. Estrogeni povećavaju nivo DRG u plazmi (koji su uočeni tokom trudnoće ili uzimanja oralnih kontraceptiva). Njegova koncentracija je također povećan za hipertireoza, diabetes mellitus, određene bolesti krvi ili zbog genetskih razloga. Smanjenje DRG karakteristika njegovog nedostatka porodice, hipotireozu i nedostatak proteina (teška bolest jetre, ili nefrotski sindrom).

albumin
albumin kapaciteta za kortizol je mnogo veći, ali afinitet - ispod. Normalno, albumin veže oko 15% kortizola prisutan u krvi, ali u slučajevima kada je ukupna koncentracija kortizola kapacitet vezivanja od DRG, udio kortizola vezan za albumin povećava. Albumin veže aktivni sintetički glukokortikoidi (npr oko 75% deksametozona plazma je vezan za albumin obrazac).

Vezivanje androgena
Androstenedione, DHEA i DHEA-sulfata cirkuliše u krvi, koji su vezani za albumin labave spojnice. s visokim afinitetom testosterona u interakciji s drugim vezujući globulin spolnih hormona (SHBG).

laboratorijskim nalazima

Postoje specifične metode za određivanje kortizola i nadbubrežnih androgena u plazmi. Aktivnost kore nadbubrežne žlijezde može suditi prema nivo steroida u urinu (posebno, dnevni izlučivanje kortizola). Korisne informacije definira koncentracije ACTH u plazmi. Rezultati određivanja ukupnog nivoa steroidnih hormona u plazmi ovisi o koncentraciji vezivanja proteina. Osim toga, s obzirom da je koncentracija ACTH i nadbubrežnih hormona u plazmi značajno osciliraju tokom dana, rezultati jedne definicije su vrlo nepouzdani. Da biste dobili više dijagnostičke informacije adezhnoy obično koriste dinamičke test (Stimulacija ili supresivnu) i brzine pokazatelja kortizola sekrecije.

Koncentracija ACTH u plazmi

metode za određivanje
ACTH koncentracije u plazmi - vrlo precizan pokazatelj stanja hipofiza-nadbubrežna osi. Pri određivanju osjetljivih Imunometri način normalno kreće se u rasponu 9-52 pg / ml (2-11,1 pmol / l).

interpretacija
Određivanje nivoa ACTH u plazmi često vodi kako bi se utvrdilo lokalizaciji primarnog uzroka nadbubrežne disfunkcije.

1. U primarnom nivou adrenalna insuficijencija ACTH povećan, a na hipofize patologije i sekundarna adrenalna insuficijencija svoj nivo "normalno" ili ne do 10 pg / ml (2,2 pmoles / l).
2. U Cushing sindrom, nadbubrežne tumor uslovljeno kortizolprodutsiruyuschey, ima dijagnostički pad značaj u plazmi ACTH ispod 5 pg / ml (1,1 pmol / l), dok je za Cushing bolest (ACTH hipersekrecije) njegovog nivoa plazmi je normalan ili povećan.
3. razine ACTH u plazmi se obično naglo porastao u sindrom ektopične ACTH sekrecije, iako kao značajan porast u svoju zajedničku i Cushing bolest. Osim toga, kada se koristi immunoradiometric metodom, dvostruko antitijela (IRMA) ACTH u rijetkim slučajevima ovog sindroma je povećana u manjoj mjeri, s obzirom da ova metoda ne definira ACTH makromolekularne prekursora.
4. razine ACTH u plazmi i dramatično veći kod pacijenata sa zajedničkim oblicima kongenitalne adrenalne hiperplazije, koji se koristi za dijagnozu ovih poremećaja i praćenje njihovog liječenja.

koncentracija kortizola u plazmi

metode za određivanje
Kortizola u plazmi se najčešće određuje metode radioimunoeseja (RIA) ili visoke tečnom hromatografijom učinka (HPLC). Ove metode kortizola u plazmi utvrđena ukupno (vezan i besplatno). Pljuvačka sadrži samo slobodan kortizola i analizu pljuvačke omogućuje jednostavan i pouzdan za procjenu koncentracije slobodne forme hormona.
Princip RIA je da inhibira vezivanje oznakom kortizola antitijela kortizola prisutan u uzorku plazme. Osjetljivost modernih metoda RIA omogućava korištenje malih količina plazme. Osim toga, trenutno koristi antiserumi teško komuniciraju s drugim endogenih steroida, a samim tim i rezultati RIA precizno odražava sadržaj ukupnog kortizola u plazmi. Važećim antitijela može unakrsno reagirati s određenim sintetičkim glukokortikoida (npr prednizon), ali drugi se obično koriste drogu ne utječu na rezultate takvih određenja.

interpretacija
Single određivanje koncentracije kortizola u plazmi lišena dijagnostički značenje kao epizodno kortizol luči i, štoviše, njegova povećava nivo za bilo stresa. Više pouzdane informacije dobijene dinamičan HPA testiranje sistema stanju.

1. Normalnog nivoa. Normalnog nivoa kortizola u plazmi ovisi o definiciji metode. Prema RIA, kortizola sadržaja u sati kreće se 8 iz 3 do 20 mg% (80-550 nmol / L), u prosjeku 10-12 g% (275,9-331,1 nmol / l). U kasnijim, ove vrijednosti su umanjene sati i 4 sata ujutro oko pola. U rasponu od 22:00 i koncentracije kortizola 02:00 je obično manje od 3% ug (80 nmol / l). nivo kortizola u pljuvački u ponoć je manji od 0,15 g% (4 nmol / l).
2. Razine u vrijeme stresa. Kortizol lučenje povećanja raznih bolesti, u toku operacije i trauma. Pod tim uvjetima, koncentracija kortizola u plazmi može dostići 40-60 mg% (1100-1655 nmol / l).
3. Povećana koncentracija estrogena. ukupni nivo kortizola u raste plazmi sa povećanjem kapacitet vezivanja DRG koji se često javlja u visokim sadržajem estrogena u krvi (npr za vrijeme trudnoće ili upotreba egzogenih estrogena ili oralni kontraceptivi). koncentracija kortizola u takvim slučajevima je 2-3 puta veća od normalne.
4. Drugoj državi. DRG sadržaj može se razlikovati s drugim uvjetima. Ukupna koncentracija kortizola povećanja anksioznosti i depresivna stanja, u gladi, anoreksije, alkoholizma i hronične bubrežne insuficijencije.

Kortizola u pljuvački u kasnim noćnim satima

Većina pacijenata s Cushing sindrom poremećen cirkadijalni ritam kortizola sekrecije, i njegov nivo (za razliku od norma) se ne svodi na 11-12 sati u noć. Ovo može poremetiti san i dovesti do psihičkih problema. Povećan nivo kortizola u plazmi u ponoć (u ljudi koji spavaju) karakteristike Cushing sindrom nije samo norma, ali i iz stanja kao što su depresija ili alkoholizam. Prema jednoj studiji, koncentracije kortizola u krvi u ponoć prelazi 5,2 mg% (140 nmol / L), za dijagnosticiranje Cushing sindrom sa 100% osjetljivost i 77% specifičnost. Međutim, ove definicije su teški, a mnogi kliničari vole dijagnosticirati Cushing sindrom, nivo kortizola u pljuvački noću. sadržaj kortizola u pljuvački je u ravnoteži sa slobodnim kortizola u krvi ne zavisi od količine pljuvačke i ostaje stabilan za nekoliko dana.
Pomoću različitih alata lako prikupiti pljuvačke kod kuće. Nedavne studije su pokazale da povišene razine kortizola u pljuvački noću je pouzdan znak Cushingov sindrom. Osjetljivost i specifičnost ovog indeksa prelazi 90%, a ovu odluku može biti najviše jednostavan i efikasan način skrining bolesnika sa sumnjom na hypercortisolemia. Referentne vrijednosti koncentracije kortizola u pljuvački ovisi o definiciji metode.

} {Modul direkt4

Kortikosteroidi u urinu

free kortizola

1. Metode za određivanje. Određivanje urinarnog slobodnog kortizola u urinu - pouzdan način za dijagnozu Cushingov sindrom. Normalno slobodno kortizola u urinu je manje od 1% od luči hormon. Međutim, kada je prekomerno lučenje koncentracije kortizola prelazi obavezujuće kapacitet DRG, i nivo slobodnih hormona u plazmi, te je povećao izlučivanje. Sadržaj slobodnog kortizola određuje dnevni uzoraka urina HPLC, RIA, a od nedavno, koristeći gasne hromatografije / masene spektrometrije.
2. Normalnog nivoa. Trenutno, najviše specifična metoda za određivanje kortizola u urinu HPLC. Normalne vrijednosti slobodnog kortizola određen ovom metodom kreće se od 5 do 50 mikrograma (14-135 nmol) po danu. Kada koristite tehnike RIA normalno kortizola u urinu 20-90 mikrograma (50-250 nmol) po danu.
3. Dijagnostički značaj. Urin lako razlikovati od Cushing sindrom gojaznost, budući da je sadržaj slobodnog kortizola u urinu (za razliku od 17-gidroksikorti kosteroidov) ne povećava u gojaznosti. Kortizola u povećava urina pod istim uvjetima kao i njegov sadržaj u plazmi, a malo može povećati za vrijeme trudnoće. Kada adrenalna insuficijencija takav način da se procijeni lučenje kortizola ne odnosi, na osnovu niske osjetljivosti metode, i zbog niske kortizola izlučivanje je karakteristika mnogih zdravih ljudi.

17 Gidroksikortikosteroidy
Trenutno, definicija izlučivanje ovih spojeva u urinu izgubio svoju važnost, jer je bilo moguće utvrditi plazme nivo kortizola i besplatan kortizola u urinu.

Suzbijanje uzorak sa deksametazon

Uzorak sa najmanjom dozom
Uz pomoć ovog testa možete odbiti ili potvrditi dijagnozu Cushing sindrom, bez obzira na uzrok. Normalno, deksametazon, bili aktivni glukokortikoida, potiskuje lučenje hipofize ACTH, što dovodi do pada glukokortikoida razine u plazmi i urinu. Tako provjerio sigurnost mehanizam povratne HPA osi. Cushing sindrom Ovaj mehanizam je slomljena, i lučenje steroida deksametazona ne smanji. Deksametazon u dozi koriste ne ometa određivanje kortizola u plazmi i urinu.
Za skrining bolesnika sa Cushing sindrom se obično vrši preko noći test sa 1 mg deksametazona. Deksametazon se primjenjuje u 11:00 i razinu kortizola u plazmi se utvrđuje u jutarnjim satima. Ako je nivo niži od 1,8 mg% (50 nmol / L), u Cushing sindrom vjerovatno će biti isključena. Ako nivo kortizola prelazi 10 mg% (276 nmol / L), a zatim (u nedostatku razloga za lažno pozitivnih uzoraka) to ukazuje na prisutnost sindroma. U ovim slučajevima, dijagnozu treba potvrditi drugim sredstvima. nivo kortizola između 1,8% i 10 ug neinformativan.
Prijavite odgovor na deksametazon nalazi se u 80-99% pacijenata sa Cushing sindrom. Lažno negativni rezultati ovog suđenja su češći u blagom hypercortisolemia, kao iu slučaju sporog metabolizma deksametazon, kada je nivo u plazmi iznad očekivanih. U takvim slučajevima, plazmu istovremeno odrediti sadržaj deksametazona i hidrokortizon.
Lažno pozitivni rezultati su uobičajeni u hospitaliziranih pacijenata i onih sa hroničnim ili akutne bolesti, kao što su depresija i anksioznost, alkoholizam, visok nivo estrogena i uremije. Pacijenata koji su uzimali fenitoin, barbiturati, i drugi agenti koji izazivaju sintezu enzima mikrozomalnim jetre, deksametazon može raspasti brže i ne postigne koncentracija potrebna za smanjenje nivoa ACTH.

visoke doze uzorak
Takve analize izvode se razlikovati Cushing bolest (hipersekrecije ACTH od strane hipofize) sindrom vanmaterične lučenja ACTH i nadbubrežne tumora, jer je u prvom slučaju superphysiological doze deksametazona i dalje može inhibirati sekreciju ACTH i kortizola, dok je u nadbubrežne tumora i, u većini slučajeva, ektopične ACTH lučenje to ne dogodi. Nažalost, vrlo često postoje izuzeci od ovog pravila, što zahtijeva veliki oprez u tumačenju rezultata tih uzoraka.

1. Kratak test sa visokim dozama deksametazona. Unaprijed određena početne koncentracije ujutro kortizola u plazmi. U 11 h INGEST dati 8 mg deksametazona i kortizola u plazmi su utvrđene u 8 sati sljedećeg jutra. U bolesti koncentracija kortizola Cushing u plazmi po pravilu, to je manje od polovine originalne, au sindrom ektopične ACTH sekrecije, ili se ne smanjuje, ili se svodi na puno manjoj mjeri. koncentracija kortizola u plazmi se ne smanjuje i nadbubrežne tumora koji izlučuju kortizol samostalno. U ovim slučajevima, ACTH sekrecija je potisnut već u početku visok nivo endogenih kortizola, deksametazona i efekt se ne pojavljuje.
2. Long uzorak sa visokom dozom deksametazona. Deksametazon gutati 2 mg svakih 6 sati za 2 dana. Pre i na drugi dan nakon što je prikupljeno početka deksametazona dnevno urina. U Cushing bolest kortizola izlučivanje je smanjen za više od 50%, dok je kod nadbubrežne tumorima ili vanmaterične ACTH lučenje ostaje praktično na početku. Međutim, neki pacijenti sa sindromom ektopične ACTH sekrecije visoke doze deksametazona ipak smanjiti izlučivanje kortizola i, u nekim slučajevima, Cushing bolest izlučivanje hormona je smanjena u mnogo manjoj mjeri. Dijagnostički osjetljivost, specifičnost, i preciznost rezultata ovog testa je samo oko 80%. Povećati svoje specifičnosti i preciznost moguće, fokusirajući se ne na kortizol izlučivanje, i druge kriterije. Ipak, sve više i više očito da uzorak sa visokim dozama deksametazona sprječava pouzdano razlikovati hipofize ACTH hipersekrecija negipofizarnoy, bez obzira na kriterije za vrednovanje rezultata.

Hipofiza-nadbubrežna rezerve

Određivanje hipofize i nadbubrežne rezerva se koristi za procjenu sposobnosti HPA sistema da odgovori na stres. Za ovaj upravlja ACTH (koji direktno stimuliše lučenje kortikosteroida) metirapon (koji inhibiraju sintezu kortizola i na taj način stimulira lučenje ACTH), ili insulin (što izaziva hipoglikemiju, stimulira lučenje CRH i stoga ACTH). Kasnije, za direktnu stimulaciju hipofize lučenja ACTH kortikotrofami počela da primenjuje KRG.

ACTH Uzorci

1. Metodologije i normalne vrijednosti. Kratak test ACTH stimulaciju omogućava da proceni akutne adrenalne odgovor na stimulaciju vrši se za dijagnozu primarnog i sekundarnog adrenalna insuficijencija. sintetički ^1-24 Ljudskih ACTH (tetrakozaktid ili kosintropin). Posni prije testa opcionalno, i može se obaviti u bilo koje doba dana. Nakon utvrđivanja osnovne kortizola intramuskularno ili intravenski 0,25 mg tetrakozaktidom i odrediti sadržaj kortizola u plazmi nakon 30 ili 60 minuta nakon injekcije. Jer je maksimalna koncentracija ACTH u uzorku prelazi 10.000 pg / ml, ovog uzorka odražava maksimalni kapacitet lučenje kore nadbubrežne žlijezde. Maksimalni porast razine kortizola nakon 30-60 minuta bi trebala prelaziti 18-20 mg% (497-552 nmol / L). Ovaj porast u 30. minutu je konstantna i ne ovisi o bazalni koncentracije kortizola. Osim toga, ne zavisi od toga da li je ACTH administrira u dozi od 250, 5, ili čak 1 mg. Porast razine kortizola kao odgovor na administraciji od 1 mg ACTH je osjetljiviji pokazatelj adrenokortikalnu funkcije i omogućava da odaberete među primanje dugoročne kortikosteroida, onih pacijenata čiji odgovor na 250 mikrograma ACTH normalno, ali 1 ug - oslabljen. Uzorak sa 1 ug ACTH bolje tolerisati i, po svemu sudeći, je metoda izbora zbog sumnje adrenalna insuficijencija. Ne može biti manja informativne određivanje kortizola u pljuvački nakon primjene ACTH.
2. Smanjena odgovor. Slab nadbubrežne odgovor na akutnu stimulaciju potvrđuje dijagnozu adrenalna insuficijencija. Kada neuspjeh primarne adrenokortikalnu lučenje kortizola smanjuje i povećanog lučenja ACTH. Stoga nadbubrežne početku stimulirana u najvećoj mjeri, i administracija egzogenog ACTH ne povećava lučenje kortizola. Drugim riječima, u ovom slučaju postoji smanjenje nadbubrežne sekretorni rezervi. U srednjim adrenalna insuficijencija (zbog nedostatka ACTH) i neto zona zrak korteks atrofije i suštinski ne odgovara na akutne ACTH stimulaciju. Kao i kod primarnog i sekundarnog neuspjeha kada adrenokortikalnu njihov oslabljenih odgovor na akutnu ACTH stimulaciju omogućava očekivani odgovor slabljenje na insulin hipoglikemiju, metyrapone i hirurške stresa.
3. Normalna reakcija. Normalan odgovor na akutnu ACTH stimulaciju eliminira oba primarna adrenalna insuficijencija (što dokazuje i očuvanje tih rezervi sekretorni žlijezde), i jasno sekundarne adrenalne insuficijencije (zbog atrofije). Međutim, reakcija ne isključuje normalan parcijalne manjak ACTH (smanjenje hipofize rezerva), budući da je bazalni izlučivanje tropskog hormona može biti dovoljna da spriječi atrofija nadbubrežne žlijezde, ali neće rasti pod stresom. U takvim slučajevima, uzorci prikazani sa metyrapone, inzulina ili hipoglikemija AWG.

Test sa metyrapone
Uzorak sa metyrapone se koristi za dijagnozu nadbubrežne neuspjeha i procijeniti hipofiza-nadbubrežna rezervi. Metyrapone blokira sintezu kortizola, inhibira LLP-hidroksilaze, koji pretvara 11-deoxycortisol na kortizola. To stimulira lučenje ACTH, što povećava lučenje 11-deoxycortisol i njegov nivo u plazmi. Ako sumnjate na nedostatak hipofize ACTH se često koriste kratak test deksametazon. Sumnja se da primarna adrenalna insuficijencija bolje provjeriti sa kratkim test ACTH. Sample rate noću s metyrapone razini 11-deoxycortisol u plazmi bi trebao biti veći od 7% ng (0,2 nmol / L), i ACTH - 100 pg / ml (22 pmol / l). Smanjena odgovor ukazuje na neuspjeh kore nadbubrežne žlijezde. Normalna reakcija na metyrapone omogućava da predvidi normalna reakcija na stres, i insulin-ruku hipoglikemije.

Test inzulinom hipoglikemijom
Izazvan stresom hipoglikemija, praćeno oslobađanjem AVG, što dovodi do povećanog lučenja ACTH i kortizola. Tako, koristeći ovo suđenje ocijenili funkcionalnog integriteta HPA sistema i njegovu sposobnost da odgovori na stres. Normalno, nivo kortizola povećava u plazmi bi trebao biti veći od 8 mikrograma% (220 nmol / L), a njegova maksimalna koncentracija - 18-20 mg% (497-552 nmol / L). koncentracije u plazmi ACTH odgovor na hipoglikemiju obično povećan za više od 100 pg / ml (22 pmol / l). Normalno nadbubrežne kortizola isključuje neuspjeh i smanjenje hipofize ACTH rezervi. To znači da ljudi sa normalnim odgovor na hipoglikemiju nije potrebna dodatna količina kortizola u vremenima bolesti ili operacije.

Uzorak sa KRG
ACTH reakcija na CRH ojačan sa primarnim adrenalna insuficijencija i offline kada gipopitui-tarizme. U patoloških procesa u hipotalamusu, ova reakcija mogu biti odloženi. Uzorak sa KRG se vrši u cilju utvrđivanja uzroka Cushingov sindrom.

androgena
Androgena lučenje obično ocenjuje za njihov bazalni nivo kao suzbijanje i Stimulacija uzorak je u ovom slučaju manje informativan nego za kršenje glukokortikoida sekrecije. Postoje metode za određivanje DHEA, DHEA-sulfat, androstenedione, testosteron i dihidrotestosteron. slobodan nivo testosterona u plazmi direktno odražava biološku aktivnost, ali komercijalni kitovi za svojoj definiciji ne ne uvijek dati točne rezultate.