Genetski i raka imunoterapije

Zbog toga, sve veći interes za novim metodama nišanske (ciljane) terapije.

Do genske terapije ostvariti transfer genetskog materijala u terapijske svrhe u ćeliju, tkivo ili organ, gdje materijal počinje da izrazi određeni proizvod gena.

u umetnosti rekombinantne DNK napretkom tehnologije omogućuju novi uvid na rast ljudskih stanica, mehanizmi njegove regulacije i njegovo kršenje tokom procesa tumora.

Za uspješnu gensku terapiju potrebno je sljedeće:

• identificirati i izolirati funkcionisanju gena, koji nakon uvođenja u ćeliju, tkivo ili organ eliminirati genetski poremećaj;
• razviti način isporuke gena u ćeliju;
• biti u stanju da kontroliše izraz uveo gena.

Uprkos činjenici da je svijet učinio više od 600 kliničkih

studije o genske terapije, većina njih predstavlja faza I i II kliničkih ispitivanja. Trenutno ne postoji službeno kažnjeni za kliničku primjenu tehnike genske terapije. U Velikoj Britaniji, ovaj problem se upravlja Savjetodavnog odbora za gensku terapiju. Kao i kod drugih novih terapija, genske terapije dok je pokušavao da pacijenti sa naprednim fazama raka. Međutim, u budućnosti, po svemu sudeći, njegova uloga je posebno značajno u liječenju raka u ranoj fazi, odnosno nakon operativnog uklanjanja tumora (i.e., primjenjuje se kao pomoćno sredstvo terapija).

Trenutno pod metode razvoja u području genske terapije, dijelom se koristi u imunoterapije raka koji donosi ova dva trenda u jednu - rak Imunogenetika.

Imunoterapija se temelji na efekte na imunološke mehanizme razvoja malignih tumora. Ovaj efekat je usmjeren i na povećanje aktivnog imuniteta, kao i stvaranje pasivnog biološkim agensima.

Imunoterapija mogu biti dva tipa:

• nespecifične;
• specifična - koriste droge koji se vezuju za tumor antigene.

Ideja o stvaranju vakcine rak nije nova. Ona se prvi put pojavio u periodu kada je dokazano ulogu infekcije u početku razvoja pojedinih tumora:

• VLCH - rak grlića maternice;
• HBV - hepatocelularnog karcinoma;
• VEB - Burkitt limfoma i nazofarinksa karcinom.

Zatim je predloženo da se pojavljuju vakcina protiv određenih tumora antigena koja se tretira i tumora, od kojih su infektivne prirode nije dokazano. Prednost ove metode liječenja bi bilo moguće proizvesti određenu imuni odgovor na uvođenje genetski faktori koji su prošli pojačanja i naknadno širenje djelujući na ćelije tumora u udaljenim dijelovima tijela. Većina modernih "istraživanja genske terapije pomoću immunogenetic metoda.

Pristupi rak gensku terapiju

Somatskih gen defekt korekcije:

• ekspresije gena supresor rasta tumora;
• izraz prekid mugantnogo onkogena antisense oligonukleotida.

Genetska aktiviranje proleka.

Genetska za imunitet:

• non-specifična imunoterapija;
• specifična imunoterapija.

Somatskih gena defekt korekcija

Ekspresije gena supresor rasta tumora

Supresor gena rast tumora u karcinogeneze gube svoju funkciju. Potpuni gubitak supresije funkcija inicijalnog promovira rast tumora ili se progresije tumora mjesto samo u inaktivacije oba alela gena. Na primjer, p53 gena kodira nuklearni protein koji djeluje kao faktor transkripcije, blokira progresiju tumora. Oko 50% ljudskih tumora ćelije raka otkriti mutant p53 proteina, izgubio svoju funkciju. Mutacije mogu biti naslijedila ili stečena. K geni, tumor supresor geni uključuju i RB1 (Retinoblastom), i E-kadherina.

Video: Novi non-virusnih gena lek za rak

eksperimenti model tumora u in vivo gen-zamjena mutant tumor supresor normalne kopije gena preko virusnih vektora dovodi do supresije rasta tumora i obnovu normalnog fenotipa. Međutim, transfer ovih preliminarnih nalaza u kliniku nije dala ohrabrujuće rezultate. U fazi I i II kliničkih ispitivanja u NSCLC pacijenata sa p53 mutacija gena uvođenje antiretroviralne vektor tumora sa divljeg tipa p53 nije dao efekta. Ne postoji razlog da se vjeruje da je uspješan korekcija p53 gena u kombinaciji sa hemoterapijom, kao što su cisplatin, mozhrt smanjiti izraz u tumorske stanice toj liniji.

izraz prekid mutaitmogo onkogena antisens oligonukleotida

Proto-onkogena - geni koji se aktiviraju u procesu karcinogeneze. Gene proizvod je protein (npr faktor rasta ili transkripcije faktor), koji igra ključnu ulogu u regulaciji proliferacije ćelija. Za povredu normalne regulacije podjela ćelija, proto dovoljno mutacija (nasljedne ili stečene) je samo jedan primjerak. Antisens DNK oligonukleotidi su kratke sintetičke sekvence nukleotida koje su komplementarne na određene sekvence DNK ili RNK koje su dizajnirane da se odvoje onkogena. Upotreba antisens oligonite-nukleotida - inhibicija transkripcije ili prevođenja mRNA proteina mRNA. Ovo ograničava ekspresije gena, a time i formiranje proizvoda gena.

Dakle, BCL-2 je onkogen, koji igra ulogu u razvoju raka prostate otpornog na hormonsku terapiju. Izraz bcl-2 gen doprinosi tumora struci. Prekomjerna Bcl-2 ćelije uzrokuje otpornost na apoptoze. Ovaj gen je meta G3139 antisens molekula. Lek oblimersen (genasens), nastao na osnovu oligonukleotida, je trenutno u fazi kliničkih ispitivanja kod pacijenata sa uznapredovalim rakom prostate. Još jedan primjer suđenja antisens oligonukleotida prolazu služi ISIS 3521 (affinitak), svoj cilj - ne-receptora tirozin kinaze. koja gustoća raste kada veliki broj čvrstih tumora, uključujući NSCLC.

Gen aktiviranje prodrugs

Glavni nedostatak moderne hemoterapije - nedostatak selektivnosti akcije. Da se poveća selektivnost metodom prijenosa gena. Ciljanje uključuje sljedeće korake.

• Gena kodira enzim koji aktivira droge, ugrađena je u tumorskih ćelija.
• Nakon toga, redovno upravlja prolek.
• Aktiviranje enzima pretvara prolek u toksični metabolit
• Tumorskih stanica umire kao rezultat sljedeće izmjene: lokalne formiranje metabolita- citotoksični učinak takozvanih "svjedok", u kojoj ne transgenih ćelija, dok je u mješovitim stanovništvom ćelija ubijen u prisustvu proleka difuzijom ovog drugog, a uključuje aktivni transport lokalni imunološki može answer- osigurati djelotvornost metode, čak iu odsustvu vrlo učinkovit prijenos gena.

Svrha metode prijenosa gena, - maksimalni broj uništavaju tumorske stanice istovremeno smanjujući sistemske toksičnosti.

Metoda je poznat pod različitim imenima:

• prolek aktiviranje gensku terapiju (GPAT - genetski prolek aktiviranje terapija);
• Gen regulaciju enzima proleka sistema (GDEPT - gen-usmjerena enzim prolek sistem);
• terapije zasnovane na regulaciji enzima proleka preko virusnih vektora (VDEPT- virus režirao enzim prolek terapija), transfer gena pomoću virusnih vektora;
• suicidalne genske terapije.

Glavni nedostaci metoda aktivacije gena prodrugs su:

• nedovoljno efikasan transfer gena u tumorske stanice povezane sa nesavršenosti postojećih vektora;
• potrebu za direktnim intratumorska ubrizgavanje gena, u kojima je efekt nije uobičajeno, ali samo vrlo ograničen otoka.

Video: Gordon №172 Rak imunoterapija

Trenutno, studije su dizajnirane da odgovori na pitanje da li je aktiviranje ennaya od prodrugs da se preselio iz oblasti teorije u praksi, još nisu završeni. Jedan prototip enzim prolek sistem Activatable gen je bakterijski nitroreductase. Ona pretvara prolek SV1954 (može se intravenski ili intraperitonealno bez straha od komplikacija) u vrlo otrovan alkilirajućim agent nitrobenzamidin. Nitroreductase gen bi se mogle uvesti u tumor direktnim ubrizgavanjem. Naknadne sistemsko administriranje proleka SV1954 bi dovelo do njega se gadi u citotoksičnih nitrobenzamidin samo ako je gen umetnut u ćelijskom genom. Terapijski efikasnost ove metode još nije dokazano, ali je trenutno u toku studija kod pacijenata s rakom jetre.

gen za imunitet

Non-specifična imunoterapija

Svrha ne-specifična imunoterapija - povećati imuni odgovor u cjelini, ali ne i izazvati imuni odgovor protiv određenog antigena. Pacijent je vakcinisano tvari koje izazivaju imunološku reakciju koja bi mogla da zaustavi ili usporen rast tumora. Ranije studije su provedene sa BCG i citokina, kao što je interferon alfa i interleukin-2.

specifična imunoterapija

Razvijanje brojne metode za izazivanje imunološke reakcije na tumor specifične antigene.

Antigeni meta bi trebao imati sljedeće osobine:

• izražena samo u tumorskih ćelija, i to samo u vrlo malim količinama u drugim tkivima;
• izražena kao ćelije primarnog tumora i njegovih metastaza ćelije;
• ili priznata od strane imuni sistem na površini ćelije, ili u obliku fragmenata, u vezi proteina od glavnih histokompatibilnosti kompleks (MHC).

Slijedeće sekcije ističu trenutno u metodama razvoja indukcije specifičnih antitumorski imuni odgovor.

Pripreme cijele tumorskih ćelija

Individualni vakcina za svakog pacijenta generiše na osnovu materijala dobijenog iz sopstvenog tumora, i obično se upravlja sa pripremom adjuvans, kao što su BCG.

Nema potrebe za identifikaciju specifičnih tumora antigene.

Mogućnost dobijanja vysokoimmunogennyh vakcina za kliničku upotrebu je ograničen.

Ohrabrujuće rezultate od tumora na vakcine na maloj grupi pacijenata koji su imali operaciju raka debelog crijeva. Vakcina se neznatno povećava trajanje perioda bez recidiva.

peptid vakcine

Ako izolirati i identificirati tumor antigen, peptide izvedene iz antigen, može se koristiti kao elitopov za imunoterapija. Da stimuliše imuni sistem se može koristiti sintetički epitope. Do sada testiran na klinici intradermalni ili supkutane injekcije, obično u kombinaciji sa imunološki adjuvans BCG. Dodatno povećava mogućnost vođenja prepoznavanja antigena kroz tumor imunološki nadzor i stoga njegovo odbacivanje. Primjer specifičnih tumorskih antigena peptida, su trenutno u studiju, je Mucin. To je visoke molekularne težine glikoprotein izrazio na ćelije gastrointestinalnog sluznice. U velikom broju malignih bolesti, uključujući rak pankreasa i raka debelog crijeva, kažu njegove prekomjerna. To još uvijek nije dovoljno dokaza za povezanost između imuni odgovor i kliničku korist.

DNA vakcine

Umjesto korištenja kao tumor antigen proteina može biti odabran kao ciljni gen, prekomerno u pacijenata koji se podvrgavaju tumora. To podrazumijeva stvaranje rekombinantne DNA vakcine, u kojem se vektor koristi za prijenos DNA kodira protein tumor. Predstavljanje antigene proteina izaziva humoralni i celularni imunitet. Kao ciljevi za DNK vakcine biraju sljedeće podloge.

• Je mutirani gen je tumor supresor 053. prisustvu više od 50% bolesnika od raka.
• Carcinoembryonic antigen - glikoproteina stanične membrane i njegova prekomjerna zabilježen je u većine pacijenata s rakom debelog crijeva. Normalno nizak nivo izražavanja ovog antigena u napomeni ćelija debelog crijeva i sluznice žučnih puteva. Gena. kodiranje karcinoembriogeni antigen je umetnuta u različite vektori za upotrebu kao vakcina. Iako su brojna klinička ispitivanja u fazama I i II potvrdio dobru podnošljivost DNK vakcine protiv karcinoembriogeni antigen, dokaz njegove kliničke efikasnosti postoji
• MAGE-1 - fetalni proizvod gen povezan s rakom dojke i melanoma.
• Protein Her-2 / neu - EGF receptor, intracelularni domene koje imaju tirozin kinaze aktivnost.

Nedostatak DNA vakcina - ograničen broj tumora specifične antigene. Većina ciljnih antigena nisu strogo specifične za tumor i izražene su, iako u manjim količinama, normalnim ćelijama. vakcine protiv raka i dalje treba da prođe kroz klinička ispitivanja.

Vakcinacije dendritičke stanice

Efekti na imuni sistem da selektivno ciljaju anti-tumorskog tkiva, povezana je sa mnogim teškoćama. To je izuzetno važno odabrati odgovarajući antigen. Međutim, uspjeh ovisi o optimalnom prezentaciju ovih antigena na imuni sistem. Potreba da pruži efikasnu zastupljenost dovela je do uvođenja dendritske ćelije sa antigenima. Dendritičke stanice imaju izraženu sposobnost obrade i prezentacije antigena potrebna za razvoj primarne HLA ograničena T-cell imunitet, tako važna za infekcije, autoimune bolesti i malignih tumora. Ove ćelije izražavaju veliki broj HLA molekula i drugih membrane molekule. Nedavni napredak u tehnologiji omogućili su istraživanja kako bi se njegovati in vitro dendritičke stanice iz prekursora iz krvi i koštane srži korištenjem ditokinov. Možete uvesti egzogeni antigen u kulturan dendritičke stanice, kao što su tumora proteina, peptida ili RNK) ili gen koji kodira tumor antigen (preko metode fizičkog prijenosa, ili virusnih vektora). Nadamo se da uz istovremene primjene antigena od strane dendritičke stanice maksimalno povećati naknadni odgovor T stanica i na taj način poboljšati prepoznavanje tumora peptida. Međutim, dendritičke stanice su teško kulture, a klinička ispitivanja sprovedena do sada, malo, a as oni su samo u ranoj fazi.

Video: 172 Rak imunoterapija

isporuke gena

Za uspjeh genske terapije sistema za dostavu potrebne su, kroz koje lažno efikasan transfer gena bez oštećenja ćelija. Metode broj isporuke gena.

Fizičke metode:

• Ubrizgavanje DNK u skeletnim mišićima pomoću konvencionalnih šprica i igle;
• prijenos DNK preko liposoma;
• balistički transfekcije pomoću zlato mikročestica, obložen plazmida DNK ( "gen pištolj").

Prednosti metode fizičkog - udobnost i sigurnost. Nedostaci uključuju nisku efikasnost prijenosa gena i prolazne prirode njenog izraza.

Bioloških metoda, kao što su prijenos koristeći:

• Bakterijskih vektora;
• virusnih vektora.

Prednost upotrebe bioloških vektora koji je najefikasniji i stabilan način da se osigura umetanje DNK u značajnom broju kpetok cilja. Nedostaci ove metode uključuju složenost postupka i mogućnost formiranja u domaćina neutraliziranje antitijela.

Sistemski administracija gena spriječiti sljedeće faktore:

• Visoke frekvencije cross-imune reakcije sa antitela;
• visoko imunogeni vektora.

Video: NyuVak. Rak imunoterapija tehnologija

Stoga, transfer gena se obavlja biološka metoda lokalne injekcije.

Izbor vektora za prijenos DNK zavisi od svrhe liječenja:

• za zamjenu gena je poželjno koristiti visoke virusnih vektora;
• za kratke efekt potrebno da izazovu imunološku reakciju ili senzibilizacije ćelije radioterapija, liposoma mogu se koristiti.

Isporuka mogu biti sljedeće vrste:

• ex vivo - transfer terapijskih gena u izolovanim tumor ili rak ćelija, koje se zatim reimplanted u organizam domaćina;
• in vivo - isporuka gena do ciljne ćelije, na osnovu razlike u transkripciju specifičnih gena između tumora i normalnog kletkami- ovu metodu za prijenos gena je manje efikasna.