Onkologiya-

EV Fleishman

Ruski onkološki Naučni centar nazvan po NN RAMS, Moskva

izvor RosOncoWeb.Ru

Natrag u kasnim 80-ih - početkom 90-ih, zaključeno je da chtohromosomny analiza je jedan od najvažnijih prognostičke metodovpri nelimfoblastnyh akutne leukemije (ONLL). Ovaj zaključak podtverzhdendannymi veliki multicentrično studija najviše posljednjih godina (Grimwade et al., 1998 Kern et al, 2000 Slovački et al, 2000 Visaniet al., 2001).

Ovaj izvještaj je posvećena mogućnosti tsitogeneticheskogoanaliza i svoje mjesto među ostalim prognostičkim kriterijima. Predstavlenobzor literature i vlastitih podataka, poluchennyev citogenetika laboratorija RCRC od RAMS usko svrachami hematoloških i pregrade Cancer Center i druge klinike u Moskvi (355 slučajeva ONLL).

Promjene Kariotip karakteristika ONLL, mogu se podijeliti u tri grupe u zavisnosti od njihove prognostičke vrijednosti. Pervayagruppa uključuju kromosomske abnormalnosti, predskazuje dobar odziv tretmana, udio bolesnika s bolešću bez 5-godišnje vyzhivaemostyusostavlyaet 60-70%. U grupi sa lošom prognozom Indikativno je da je veći od 10-15%. Ostale promjene kariotipa acsotsiirovanys "srednji" odgovor na terapiju (Grimwade et al., 1998). Prognostički značaj jednog kromosoma anomaliymozhno odrediti samo u odnosu na grupe pacijenata liječenih poluchavshihodinakovoe. Na primjer, bili tretirani po protokolu iz 1991. Odjel za detskoygematologii našeg centra, 16 djece sa prognostički blagopriyatnoyhromosomnoy translokacija t (8-21)"7 + 3"I nakon 1991. godine, 12 djece sa istim anomalieypoluchili tretman na modifikovanoj protokol BFM-87. Kod pacijenata podavlyayuschegobolshinstva dobiti potpune remisije. Bezretsidivnaya5 godina stopa preživljavanja u bivšoj grupe bio 15,3 + 10%, a drugo - 58,3 + 20% (p = 0,03).

Razdvajanje velikih heterogena grupa akutne mijeloične leykozovna tri prognostički grupe prema osobennosteykariotipa predloženim prije oko 20 godina (Heim i Mitelman, 1995) .Za proteklih godina, klasifikacije promijenila i nastavlja da menyatsya.Eto zbog akumulacije novih znanja o kliničkoj znacheniinesluchaynyh kromosomskih abnormalnosti.

U ovom trenutku za promjenu kariotip, imajući blagopriyatnoeprognosticheskoe vrijednosti uključuju kromosomske translokacije t (8-21) (Q22-Q22), t (15-17) (Q22-Q21), t (16-16) (P13-P22) i inverzija hromozoma 16 -inv (16) (P13-P22). Grupe citogenetske mijenja imeyuschihneblagopriyatnoe prognostički značaj uključuju promjene dlinnogoplecha kromosom 3 utiču regijama 3q21 i / ili 3q26, utratyhromosom peti i sedmi parova, brisanja iz hromosomy5 produžena ruka, translokacija t (6-9) (P23-P34) i t (9 -22) (Q34-Q13), razlichnyeperestroyki kratkom kraku kromosoma 17, i složene promjene kariotipa, odnosno leukemija sa tri ili više kromosomskih abnormalnosti. Vseostalnye slučajeva spadaju u srednji prognozu grupu. Ostanovimsyana neke nove podatke koji su važni za kliničku praksu.

Većina stranih klinika i multicentrično promjene issledovaniyahvse hromozoma regiji 11q23 iz prognosticheskineblagopriyatnym. Poznato je da su promjene u ovom području su vrlo raznolik, što je opisano u određenom području kromosomskih 11q23 translokacije boleechem 40 različitih regija kariotip. Svaki od ovih anomalija, iako je citogenetski homogena grupa može zatragivatraznye gena, a to dovodi do razlike u osjetljivosti khimiopreparatam.

Citogenetske promene, gledajući svjetlost mikroskopiiabsolyutno identični, razlikuju se kada se našlo izucheniyaispolzuyutsya za molekularnu genetske tehnike, kao što su fluorestsentnayain situ hibridizacija (FISH) i lančane reakcije polimeraze (PCR) .sa ove metode je da kada postoje ONLL razne eschebolee genetska varijacija nego što je obnaruzhenopri standardne kromosoma analize. Do danas nakopilisfakty koji ne dozvoljavaju da obuhvati sve promjene u regionu 11q23 gruppuprognosticheski nepovoljan kariotip abnormalnosti. Već serediny90 je objavio niz zapažanja pokazuju horoshemeffekte liječenje leukemije sa translokacije t (9-11) (Mrozek et al, 1997. godine, Swansbury et al, 1998 Pui et al 2000 ..): Petogodišnji vyzhivaemostsostavila 60-70 %, odnosno je isti kao u grupi sa abnormalnim kariotipom prognosticheskiblagopriyatnymi.

Nedavne studije međunarodnih multi-centar, vklyuchayuschiebolshie serije (stotine slučajeva) postupa jednako ONLL, pozvolilipridti je zaključio da je prognozu ONLL sa preuređenja vovlekayuschimirayon 11q23, određuje ne samo genima lokaliziran Vetom područja, ali i drugi član translokacije.

Drugi primjer - translokacija t (10-11) (p12-13-Q23). Ova anomalija ochenredkaya (1-2% ONLL). Ogromna većina patsientovs translokacije t (9-11) (P22-P23) i T (10-11) (p12-13-Q23) jedan je od: gena učestvuju MLL gena. Kada je translokacija t (9-11) je poznat samo jedan od mogućih partnera MLL gen koji uključuju kotorogovoznikaet fused (himerni, hibridni) gena. Istovremeno molekularne geneticheskoeizuchenie translokacija t (10-11) (p12-13-Q23) nađeni za 4 gena.Eto gena MLL i mirno, lokaliziran u regiji 11q23, i geni AF10i abi1, u 10p12-13 lokalizovan području. Podaci o dlitelnostizhizni leukemije sa hromozomskim translokacija t (10-11) do vesmanemnogochislenny. U literaturi postoje dokazi manje od oko 100 pacijenata koji su primali različit tretman. Važno je napomenuti da veliki variabelnostpokazateley preživljavanje: neki pacijenti recidiva došlo navtorom mjesec od početka remisije, dok su drugi preživjeli 5 godina. Molekularna ne geneticheskieissledovaniya uvijek nose, međutim, čini se da je himerni gen abi1-MLL povezani s blagopriyatnymprognozom znatno više od drugih himerni geni koji proizlaze iz translokatsiit (10-11) (Shibuya et al., 2001).

Sljedeće pitanje koje se mora raspravljati, brige geterogennostiprognosticheskih grupa odabrana na temelju karakteristike kariotipa, a posebno, grupa s povoljnim prognozu. Poznato je da 5-godišnje preživljavanje u ovoj grupi pacijenata je 60-70% .Before početku liječenja ili tokom perioda kliničkih i hematoloških remissiinevozmozhno tačno predvideti koji će pasti u 60-70%, au kogorazovetsya početkom relapsa. Međutim, mnogi poznati klinicheskihpokazateley povezana s lošijom prognozom, naime boleechastym razvoj ranog relapsa u ONLL. Među tim pokazateleysleduet napomenuti CD56 antigen izražavanja u eksploziji ćelijama, nedovoljno smanjenje broja eksplozije ćelija u kostnommozge na 14-21 dana liječenja, dodatnih kariotip abnormalnosti, visoka leukocitoza pri dijagnozi (Schoch etal, 1996- Baer et al., 1997- Daniels et al., 1999- Peniket etal., 1999- Ferrara et al., 2000). Tu su i navodi da znaci rezidualnog displazije (neleykoznogo) ćelija eritroidnogoi koštane srži megakaryocytic bakterija prije tretmana predveschayutnevysokuyu ONLL efikasnost u de novo (Tamura et al., 1998 Lemez et al., 2000). Da li to odnosi se na leukemiju blagopriyatnoyprognosticheskoy grupe još uvijek nije jasno. Identificirati svaki sluchaeOML prognostički negativnih simptoma u fazi postanovkidiagnoza može biti korisna za optimizaciju protokole liječenja.

Pojedinačnih prognoza, postoji rizik od recidiva i pojave vremyaego pojedinog pacijenta ONLL nemoguće procijeniti bez provođenja molekularne praćenje minimalne ostatne bolesti (MRD). Ćelija leukemije, preživljavanje uprkos primenenietsitostaticheskoy terapiju i uporni u punom kliničke i gematologicheskoyremissii predstavljaju biološki supstrat minimum rezidualnoybolezni. Ove ćelije nisu otkriveni u kliničkim testovima krvi koštane srži, ali otkrivena koristeći chuvstvitelnyhmetodov, među kojima na prvom mjestu je tsepnayareaktsiya polimeraze sa obrnutim transkripcije (RT-PCR). Set tesnayasvyaz MRD s prognozom. Pokazano je da je učestalost retsidivovznachitelno veća kod pacijenata kojima se ne otkrije minimalnuyurezidualnuyu bolest u odnosu na bolesnike gdje MRBne otkrivena. Osim toga, utvrđeno je da je više kolichestvoostavshihsya ćelija leukemije, manje je vremena od samog početka pojave relapsa remissiido (Radich, 2000). Nova količinska metodikiPTsR omogućiti MRD monitoringa je bolji od kachestvennyemodifikatsii (Tobal et al, 2000). nove koncepte "molekulyarnayaremissiya" i "molekularne relapsa". Prikazano chtopri postizanje remisije javlja znachitelnoesnizhenie nivo transkripta himernim gena. Tokom gematologicheskoyremissii određena konstanta nizak izraz himernim transkriptaili PCR-negativnost, to jest, postoji molekularna remissiya.Za 4-6 mjeseca prije transkript suschestvennopovyshaetsya pravi recidiva, odnosno, tu je molekularni recidiva.

Translokacija t (8-21) (Q22-Q22) - jedan od najčešćih kariotip spetsificheskihanomaly na ONLL. Uočeno je u 20% slučajeva u vzroslyhi 40% djece s M2 opciju. U ovom translokacija rezultatesliyaniya fragmenti dva gena - AML1 i ETO formirana himernyygen AML1-ETO. Himernim gen ili transkript može biti obnaruzhens PCR ili FISH svih pacijenata sa t (8-21). U nekim sluchayahtranslokatsiya je skrivena: ona se može otkriti da u standartnomtsitogeneticheskom test, ali samo za PCR ili FISH (Krauteret al, 1998.). transkript himerni tokom translokacija t (8-21) obnaruzhivaetsyau većine pacijenata čak i tijekom dužeg remisije (Nuciforaet al, 1993 Kusek et al., 1994). Shodno tome, kachestvennayaPTsR nije pogodan za praćenje MRD kod pacijenata sa t (8-21). KolichestvennayaPTsR omogućava procijeniti i predvidjeti efikasnost gematologicheskiyretsidiv tretman koji nužno prati molekularne relapsa (Tobal et al., 1998). Nedavno objavljene studije u kojima privodyatsyadannye da je nestanak transkripta himere ishod liječenja AML1-Etov nagoveštava dugu stabilnu remisiju (Morschauseret al, 2000).

Akutne promyelocytic leukemija (APL, M3) skhromosomnoy usko povezana translokacija t (15-17) (Q22-Q21), koji yavlyaetsyavazhneyshim dijagnostički marker akutne plućne ozljede. Kao rezultat ovog translokatsiivoznikayut himere gena PML-rara i Rara -RML. Himerni transkriptyPML-rara i rara -RML su važni markeri za praćenje molekulyarnogodiagnoza i RFI (Grimwade et al., 1997- Krauter Etal., 1998). Ha ogromna materijalna (stotine pacijenata), pokazalo se da je nestanak himerni transkripta konsolidatsionnyhkursov nakon tretmana je bio u pratnji pojave hematoloških remissii.Pri održavanja transkript, bez obzira na postizanje potpune gematologicheskoyremissii, potonji se ispostavilo da Ukratko: retsidivy.V poštovati ranijim slučajevima gdje nakon perioda PCR negativnosti ( molekularna remisija) transkript himerni je ponovo (molekularna relapsa otkrivena), gotovo uvijek najkasnije u roku od šest mjeseci razvili gematol ogicheskiyretsidiv (Diverio et al., 1998 Burnett et al, 1999). Opublikovanyneskolko uspešnih pokušaja da se spriječi hematoloških retsidivOPL, počevši tretman tokom molekularne relapsa (Grimwade etal., 1997- Diverio et al., 1998). Posljednje ovih publikatsiy- vrlo ohrabrujući: ponovljenom molekularne remisije bylidostignuty u 12 od 14 bolesnika, kao rezultat intenziviranja terapiivo vremena molekularnih relapsa.

Grupa sa povoljnom prognozom ONLL također uključena leykozys pericentric inverzija hromozoma 16 - inv (16) (P13-P22) ilitranslokatsiey t (16-16) (P13-P22), što je rezultiralo u voznikaethimerny gena CBFb-MYH11. Ove anomalije su primijećeni u svim bolnyhs morfološke varijanta AML-M4Eo, oni su pronađena 40% slučajeva AML-M4. Među svim slučajevima u kojima je otkrivena himernyygen CBFb-MYH11, samo pola su mijelomonocitna leukemije, u drugim slučajevima je dijagnosticiran M2, barem - M1 ili transkript M5.Himerny CBFb-MYH11 spojene gena je otkriven u vsehbolnyh PCR (Langabeer et al ,. 1997). Kinetiku himernogotranskripta CBFb-MYH11 u toku bolesti studirao je gore nego drugihtranskriptov pacijenata u grupi sa relativno ONLL blagopriyatnymprognozom. U većini slučajeva, puna ofanziva molekulyarnoyremissii značajno zaostaje za uspostavljanje pune gematologicheskoyremissii. transkript himerni može utvrditi do 24months od početka remisije. Recidiva nablyudayutsyau većina pacijenata čiji transkript se otkrije za više od 6 mjeseci te od početka remisije (Martin et al, 2000). Pojava nakon himernogotranskripta negativnosti perioda PCR tijekom remisije predveschaetpriblizhenie hematoloških relapsa (Laczika et al., 1998).

Naše istraživanje tim provodi molekularne pracenje statusa26 pacijenata sa prognostički povoljnih hromozomskim anomaliyami.Rabota počela prije oko dvije godine. U jednom slučaju, 21 udalosprovesti dva i šest testa PCR. U ovom izveštaju, ostanovimsyatolko na grupi pacijenata sa podacima translokacija t (8-21) (10sluchaev). U 6 od njih na isti način kao iu većini opublikovannyhnablyudeny, pronašao očuvanje himernim transkripta fonepolnoy remisija traje od 3 do 24 mjeseca. 4 pacijenta vyyavlenaPTsR-negativnost: u 2 od 3 pregledanih pacijenata tokom dlitelnoyremissii (MBFM-87 protokol), i za 2 od 4 - u ranim fazama programa postupanja otnachala AML 2000. Možda je razlog za rano (u roku od 6 mjeseci od početka remisije) nestanka transkriptayavlyaetsya smanjenje broja ćelija leukemije obuslovlennoevesma agresivne terapije. Daljnje opažanje pokazuje kakoeprognosticheskoe važnost transkript nestanak AML1-ETOu naših pacijenata.

Sada smo uzimajući naše prve korake u korištenju jednog od modifikatsiytak zove konkurentne RT-PCR za određivanje nivoa himernogotranskripta AML1-ETO u koštanoj srži i krvi pacijenata (kolichestvennyymetod). 6 ispitanika. Potvrdio literaturnyedannye smanjenja transkripta himere nakon prvog terapevticheskihkursov (indukcije i konsolidacije). U dva pacijenta, obsledovannyhneskolko puta tokom remisije, zafiksirovanopostepennoe smanjenje nivoa transkriptu. Zapažanje prodolzhaetsya.Planiruetsya intenziviranje terapije nakon otkrivanja molekulyarnogoretsidiva.

Ovi podaci ukazuju na potrebu da se nastavi sa tsitogeneticheskihissledovany ONLL da pojasni prognostički znacheniyaotdelnyh kromosomskih abnormalnosti, posebno, rijetko izmeneniykariotipa. Ove studije nisu moguće bez upotrebe molekularne geneticheskihmetodik. Velike nade se polažu u praćenju MRD kao perspektivnyymetod pojedinac prognozu.

reference:

1. Baer MR, Stewart CC, Lawrence D et al. Krv 1997. godine, 90: 1643-1648.

2. Burnett AK, Grimwade D, Solomon E et al. Krv, 1999. godine, 93: 4131-4143.

3. Creutzig U, Zimmerman M, Kitter J et al. Br J Haematol. 1999.104: 630-639.

4. Diverio D, Rossi V, Avvisati G et al. Krv, 1998. godine, 92: 784-789.

5. Grimwade D, Gorman P, Duprez E et al. Krv 1997. godine, 90: 4876-4875.

6. Grimwade D, Walker H, Oliver F et al. Krv 1998. godine, 92: 2322-2333.

7. Ferrara F, Morabito F, Martino B.J et al. Clin Oncol. 2000,18: 1295-1300.

8. Heim S, Mitelman F. Rak Citogenetika. Drugi ur., Wiley-Liss, 1995. godine.

9. Kern W, Schoch c, Haferlach T. et al. Leukemija 2000. godine, 14: 226-231.

10. Krauter J, Paschberg B, Heinze B et al. Br J Haematol.1998,103: 72.

11. Kusek R, Laczika K, Knöbl P et al. Leukemija 1994. godine, 8: 735-739.

12. Laczika K, Novak N, Hilgarth B et al. Clin Oncol. 1998 16: 1519-1525.

13. Langabeer S, Walker H, Rogers HR et al. Brit J Haematol.1997, 99: 925-928.

14. Lemez P, Galikova J, Haas T. et al. Leuk Res 2000. godine, 24: 207-15.

15. Martin G, Barragan E, Bolufer P et al. Haematologica 2000,85: 699-703.

16. Morschhauser F, Cayela JM, Martini S et al. J Clin Oncol.2000, 18 (4): 788-94.

17. Mrozek K, Heinonen K, Lawrence D et al. Krv 1997. godine, 90: 4532-38.

18. Nucifora G, Larson R, Rowley JD. Krv 1993. godine, 82: 712-715.

19. Peniket AJ, Wainscoat JS, Wheatley K et al. Krv 1999- 94: 496a.

20. Radich JP. Curr Opin Oncol, 2000. godine, 12 :. 36-40.

21. Schoch C, Haase D, Haferlach T. et al. Leukemija 1996. godine, 10: 1288-1295.

22. Slovački ML, Kopecky KJ, Cassileth PA et al. Krv, 2000. godine, 96: 4075-83.

23. Shibuya N, Taki T, Mugishima H et al. Geni Chrom Cancer2001, 32: 1-10.

24. Swansbury GJ, Slater R, Bain BJ et al. Leukemija 1998. godine, 12: 792-800.

25. Tamura S, Takemoto Y, Wada H et al 1998 Brit J Haematol.101 :. 743-748.

26. Tobal K, Liu Yin JA. Leuk Limfom 1998, 1-2: 115-120.

27. Tobal K et al. Krv, 2000. godine, 95: 815-819.

28. Visani G, Bernasconi P, Boni M et al. Leukemija 2001,15: 903-909.