Sadržaj kiselina oftalmologije-glutaminska u vlažnoj komori u bolesnika s primarnim glaukomom otvorenog ugla

Mnogi autori glutamat donosi neurotoxiceffect na retinalne ganglijskih ćelija. Moguće je da glutamicacid povećanje koncentracije u tkivima oka sa primarnim otvorenih angleglaucoma (POAG) igra važnu ulogu u vidnog živca glaucomaatrophy patogenezi.

Očne vodice od 10 pacijenata sa POAG su snimljene tokom cataractextraction i ispitati. Količine glutaminske kiseline weredetermined po hromatografskih metodom.

koncentracija glutaminska kiselina u vodenom humor kontrole groupwas 28.6 ± 1.6 MKG / ml i u grupi sa POAG - 84.9 ± 28.7 MKG / ml.The razlika nije bila statistički pouzdan. Tako da postoji atendency da glutaminska kiselina povećanje koncentracije u očima withPOAG.

PPerforman istraživanje poslednihlet značajno uticati na prezentaciju patogenezi vidnog živca glaukomatoznoyatrofii - vidnog neuropatija.

Utvrđeno je da je karakteristika je manifestacija neuropatije glaukomatoznoyopticheskoy apoptoze - smrt gangliona kletoksetchatki. Quigley [6] smatra da je oštećen može vsledstvievysokogo IOP aksona retine ganglijskih ćelija ne može se održati dostatochnoyinformatsii, što dovodi do aktiviranja mehanizma prirodnih gibelikletki. Možda su ovi procesi aktiviraju nedostatochnostyukrovotoka plovila u oku na povišenom IOP. Dokazano je chtoodnovremenno sa ovim postoji značajan porast soderzhaniyaglutaminovoy kiselina (glutamat) u staklastom pacijenata pervichnoyotkrytougolnoy glaukoma (POAG). Glutamat je glavni neyromediatoromTsNS i mrežnice. U isto vrijeme povećava glutamatavyshe fiziološke koncentracije u retini izaziva blokadu mezhneyronalnoyperedachi nervnih impulsa i u kombinaciji sa selektivnim apoptozomganglioznyh ćelije mrežnjače zbog neurotoksične efekte glutamata [5]. Brooks D.E. et al. [7] naći u psa oči glaukom eksperimentalnovyzvannoy povećan vitreal sadržaj glutamat, triptofan, i nizak sadržaj glicina u odnosu na kontrolem.Po Prema autorima, visoka koncentracija glutamata je toksičan dlyagangliev retine ishemijskog mehanizam dokazuje poremećaji javljaju u ćelijama retine.

Sama ideja o neurotoksični učinak glutamata na nervnuyutkan, posebno retine ganglijskih ćelija, zaimstvovanaiz neuroloških praksa. Neurolozi 20 godina znacheniebolshim dati koncentracije predajnika u razvoju bolesti kao što je Alzheimerova bolest, multipla skleroza, demencija, amiotroficheskiybokovoy skleroze i ostalo [4]. Povišene razine glutamatav staklastog pacijenata sa glaukom, smrt gangliona kletoksetchatki pod svoj uticaj u eksperimentima na štakorima dozvoljeno E.B.Dreyer et al. [6] ukazuje na to da mehanizam njihovog mjesta i gibeliimeet POAG. Međutim, uzrok intracelularne ne vypuskaglutamata potpuno jasno. E.B. Dreyer i dr. [6] vjerujem da je možda visoki očni tlak uzrokuje vyhoduglutamata u intracelularni prostor, koji izazivaju smrt ćelija, koji je toksičan za ganglijskih ćelija. Drugi vjerovatnim prichinoygibeli ćelije, kako kažu autori, je neuspjeh enzimskih sistema odgovoran za uništavanje neurotransmitera iz sinapsi nakon vyhodaego. Teškoća potvrđuje ova gledišta zaklyuchaetsyav da je vrlo teško provjeriti činjenice o "live" oka, međutim, nema sumnje da velike koncentracije gutamata toksichnydlya nervnog tkiva.

Imajući u vidu navedeno, cilj našeg istraživanja bio je obnaruzhenieglutamata kod pacijenata sa POAG.

Materijali i metode

Eksperimentalna grupa sastojala se od 10 pacijenata sa POAG (6 muškaraca, 4 žene, prosječne starosti - 74 godina), koji zabiralaskamernaya vlage tokom ekstrakapsularne ekstrakcije kataraktys antiglaukomatoznyh komponentu. 8 pacijenata razvio stadieyPOUG 2 sa daleko naprednije. Kontrolnu grupu činilo bolnyeso senilni katarakte - 14 bolesnika (11 muškaraca, 3 žene, prosječna dob - 68 godina). Glavni i kontrolne grupe bylisopostavimy dobi i srodnih somatskih bolesti.

Osnova metode opisane Bode i stavio Giri metode kolichestvennogoopredeleniya aminokiselina derivata u obliku bakra sa ningidridinomposle njihove kromatografske separacije na papiru u ovoj izmjeni [1].

1. Priprema uzoraka za analizu. Uzorci kamernoyzhidkosti obim 0,1-0,2 ml je težio na analitičkoj vagi, i ispari do isušivanja na vodenoj kupelji na 40 ° C u staklenoj mikroploče koristeći plutajući stativa. Suvi ostatak je otopljen u 0,05 mldistillirovannoy vode.

2. Dobivanje dimenzionalni hromatogrami zhidkostiglaza komore. 20 l dobijenih rješenja u porcijama od 5 L uz pomoć automatske pipete se nanosi na hromatografska bumagumarki "brze" veličine 2 x 27 cm. Metoda Hromatografija provodyatniskhodyaschim dva puta, prvo u jednom smjeru smesirastvoriteley I, a zatim dva puta mješavina II. Mešavine I: n-butilovyyspirt, ledene octene kiseline, destilirane vode (4: 1: 5). Mješavina II: n-butil alkohol, ledene octene kiseline, distillirovannayavoda (40: 15: 5). Nakon svakog prijenos bumaguvysushivayut otapala u zraku, a zatim stavlja u hromatografske otapala kameru.Vremya prolaz u jednom pravcu 7 sati. Vysushennuyuhromatogrammu uronjen za nekoliko sekundi u 0,5% rastvor ningidrinav aceton, sušeno postati jasnije nakon dana poetomuopredelenie kvantifikaciju aminokiselina u roku od nekoliko minuta u zraku na 50 ° C za razvoj amino okraski.Pyatna ipodogrevayut 10 minuta u pećnici da bude sljedeći provoditna dan.

3. Kvantitativno određivanje glutaminske kiseline u kamernoyzhidkosti oka. Ljubičaste mrlje odgovarajući glutaminovoykislote su izbacili, izrezati u male komadiće i staviti u microtube sadrži 0,25 ml alkoholičar rješenje bakar sulfata. Fioletovayaokraska postaje narančasta-crvena obrazovaniyamednogo rezultira amino derivat ninhidrinom. vađenje Prodolzhayutv za jedan sat na sobnoj temperaturi. Intensivnostokraski mjeri na photoelectrocolorimeter Humalyzer 2000 pridline valne duljine 505 nm u microcuvettes nabumagu protiv kontrolni uzorak. Proračuni na osnovu sadržaja aminokiselina vrši kalibrovochnomugrafiku dobija od standardnih rješenja glutaminske kiseline.

4. Izgradnja krivulje kalibracije. Gotovyatrastvory glutaminska kiselina 0.001 M, 0.00075 M, 0.0005 M, 0,000375M, 0,00025 M. U radu se primjenjuje na 20 ul rješenja. Proizvodyatpo proračun formula:

K = (C x 5 x 10^-2) / V

A - koncentracija glutaminske kiseline u vlažnoj komori (ug / ml) -C - sadržaj glutaminska kiselina koja se nalazi na kalibrovochnomugrafiku (ug / ml) - V - volumen uzorka (ml).

Rezultati i diskusija

sadržaj glutamat vlage u komori kontrolnoygruppe je 28,6 ± 1,6 ug / ml, sa POAG - 84,9 ± 28,7 mikrograma / ml (razlika nije statistički značajna, p>0.05).

Iako smo se ne dobije i statistički značajne razlike vsoderzhanii POAG pacijenata glutamat i starosti katarakte odnakoimeetsya jasan trend ka većoj koncentraciji vlage neyromediatorav komore POAG pacijenata. U 5 od 10 pacijenata sa POAG soderzhanieglutamata bio je značajno veći u vlažnoj komori nego u kontrolnoygruppe i kretala se od 37,6 pg / ml do 260,3 mikrograma / ml.

Kod pacijenata sa senilne katarakte glutaminovoykisloty najveća koncentracija je bila samo 33 mg / ml.

Učešće pojedinih neurotransmitera u regulaciji oftalmotonusapokazano u A. radovima Myagkova [2,3], koji je dokazao vliyanieopioidnyh peptida na povećanje IOP, vd elektricheskimikolebaniyami i kemijskih podražaja na amygdaloid kompleks.V rezultat podacima ne može složiti sa gipotezoyusileniya apoptoze retine ganglijskih ćelija u POAG vsledstvienakopleniya njima glutaminska kiselina. Međutim, ova gipotezatrebuet dalje proučavanje.

Istraživanja su pokazala, po prvi put u vlagu komori glutaminovuyukislotu kod pacijenata sa POAG. Sadržaj glutamatau pacijenata POAG nego u kontrolnoj grupi.

1. Medicinska laboratorija tehnologije i dijagnostike: Meditsinskielaboratornye tehnologije. Reference u 2 toma / Ed. A.M.Karpischenko // micromethod određivanje slobodnih aminokiselina u syvorotkekrovi koristeći papir kromatografije. V.2. - Sankt Peterburg, "Intermedika", 1999. - S. 106-109

2. Soft AV Impact bušiti očne uticaje uzrokovane električnih i kemijskih stimulacija mindalevidnogokompleksa: Avoref. Diss. na soisk. naučnici. korak. cand. med. nauk.- Kazan, 1997-1921.

3. Soft AV Učešće opioidnih peptida u centralnom pritisak regulyatsiivnutriglaznogo i hidrodinamički oči // Proc. Dokladov7sezda oftalmologa Rusija. - M., 2000.- S.175-176.

4. Plyahin IV Biohemijski osnova produžen do kletochnoysmerti. // međuregionalnoj zbirke znanstvenih. Rada / biokemiju narubezhe XXI stoljeća. - 2000.- Rjazanj. - S.173-177.

5. Shamshinova AM Zueva MV, Tsapenko IV, Jakovljev AA Neyrofiziologicheskieosobennosti retine i moguće kliničke elektroretinogramska .// Vestn. Oftalmol. - 1996.- №2.- S.52-55.

6. Pojave glaukoma u dokumentu // slackinc.com), Očna kirurgija News International Edition, 15. decembra, 1996. godine

7. Vitreousbody glutamat koncentracije kod pasa sa glaukoma / Brooks D.E., Garcia G.A., Dreyer E.B. na svim // Am. J. Vet. Res. - 1997.- Vol.58, N8.- P.864-867