Citogenetska analiza horionskih resica ćelija placente.

Ćelije korionski resica (Placenta) na raspolaganju za citogenetske analizu, imaju različitog porijekla:
- cytotrophoblast ćelije, diferencijacija koja proiskhoditna fazi Morula;
- mezenhimskih ćelije, koje razlikuju od unutrašnje ćelije masu embrija u fazi blastociste.

Video: Citogenetski metode istraživanja

za kromosoma analiza ćelija horion ili placenta pomoću dva osnovna načina.

1. Dugoročni kultivaciju u monolayer kulture. Kao iu slučaju analize AF ćelija, postoji veliki broj modifikacija kultivacije horionskih resica ćelija. Za više informacija o njima mogu biti u literaturi. Napominjemo samo da raste primarni kulture su heterogena ćelijski kompoziciju dominantan rasta fibroblasta nalik mezenhimskih stromalni ćelije resica. formiranja kolonija ili labave monolayer obično se javlja u 10 do 12. dana uzgoja. Osnovni principi ćelijske analize kulture horionskih resica i tumačenje rezultata su slični onima AF ćelija kultura.

2. "Direct" droga horionske resica. Način analize "direktan" formulacije na osnovu studije spontano fisionog cytotrophoblast ćelije bez prethodnog kultivacije. Prva droga korionski resica tkivo sadrži metafazi ploča zadovoljavajućeg kvaliteta, bez upotrebe ćelije kulture grupa su dobijeni Milanese istraživači na čelu G. Simoiii. U narednim godinama, to je predloženo različitih modifikacija metode, koja zatragshzayut svim fazama obrade resica. Suštinski sve od varijanti metode mogu se podijeliti u dvije grupe:
- stvarni "direktan", zasnovan na kratkoročne (2-3 sata) prije preinkubacijom native resica hipotonična tretman i fiksacija;
- "polu-direktnim"Pod pretpostavkom da povećava vrijeme inkubacije autohtonih resica u kulturi medija dodacima hrani za 24,48 ili 72 sati.

Unatoč naizgled jednostavnosti, ove metode rijetko daju konzistentne rezultate, te stoga imaju tendenciju da se koristiti u kombinaciji sa uzgojem. Tipični nedostaci direktne metode opisane oličenje su mali broj metafazi ploča Artifact gubitak kromosoma tijekom maceracije uzorka octene kiseline i mali fitness hromozoma u referentnom diferencijal bojenja sa Giemsa mrlja. Računajući broj mitoza na "Direct" i "pola-linije» pripremama je pokazao da nakon inkubacije resica za 2- 3 dana mitotska aktivnost cytotrophoblast ćelija je veća nego na 2 ili 24-satni inkubacije. Ovo ukazuje na to da u vrijeme biopsije ćelija doživljava "šok", koji ometa parametara staničnog ciklusa i vstupayutv mitoze.

razvili smo vlastitih metoda direktnog modifikacija - metoda "shake-off-utiskivanje" i brzo metoda naprijed. Korištenje velikih doza kolhicina uz istovremenu obradu u hipotonična rješenje omogućava da se dobije drogu iz CVS / placente u trudnoći od 10 do 20ned koji zadovoljavaju sve kriterije kariotipizacija. U kombinaciji sa fluorescentnim metodama diferencijal bojenje hromozoma efikasnost ovih metoda je više od 99%.

Video: Vision Cyto - Tradicionalne metode citološku analizu

Treba naglasiti da su pogodne za modifikaciju Hrane kromosoma pripreme tkiva sa visokim mitotska prirodne aktivnosti, uključujući i sve tkiva i organa embrija. Interphase jezgra, tretira na ovaj način su pogodne za FISH metoda sa specifičnim DNA sonde, što je važno u verifikaciji prenatalne citogenetičkih dijagnoze. Detaljne metode formuliranja i diferencijalna bojenja oličenje ranije opisano.

visoku efikasnost, brzinu i pouzdanost po najnižoj cijeni pruža brzo uvođenje ovih promjena u raznim prenatalnu dijagnostiku centara u Rusiji i zemljama ZND.