Mikrobiološki metoda za laboratorijske dijagnostike zaraznih bolesti

Nakon prijema rezultata inspekcije i uzimajući u obzir epidemiološki podaci set konačne dijagnoze. U dijagnostici ukazuju nozološki obliku šifre MKB-10, način potvrđivanja dijagnoze, ozbiljnost i tok bolesti, fazi bolesti, prisustvo istovremene bolesti i komplikacije, kao što su "Tifusarka (kultura krvi), ozbiljnost bolesti, period razgara- komplikacija - crijevnih krovotechenie- prateće bolest - dijabetes ". Kao precizno i ​​detaljno dijagnoza određuje terapijske strategije.

U nekim slučajevima, kada klinički podaci nisu dovoljni, a laboratorijski testovi ne dozvoljavaju da se utvrdi etiologija bolesti, može biti staging sindromski dijagnoza (npr trovanje hranom, akutnog respiratornog oboljenja, SARS).

Laboratorijska istraživanja igraju važnu ulogu u dijagnostici zaraznih bolesti, imenovanje uzročna liječenja, izvođenje praćenje efikasnosti liječenja. proces specifična laboratorijska dijagnostika To na osnovu identifikacije patogena i odgovor ljudskog tijela u toku infektivnog procesa. Sastoji se od tri faze: prikupljanje materijala, transport i istraživanja u laboratoriju. Obavljanjem svakoj fazi stavljanja specifičnim zahtjevima o usklađenosti koji određuje efikasnost laboratorijske dijagnostike. Zadatak liječnika pravilan izbor metode istraživanja i pravilno vrednovanje rezultata.

Laboratorijske dijagnostičke metode se razlikuju u osjetljivost i specifičnost. Osjetljivost metode odražava vjerojatnost da je rezultat testa pozitivan, zaraženog pacijenta i određena je odnosom ukupnog broja pozitivnih rezultata na ukupan broj zaraženih pacijenata. Što je veća osjetljivost, manje vjerojatnost lažno negativne rezultate. Kriterij specifičnosti odražava vjerojatnost da će rezultat testa biti pozitivan u nezaraženih bolesnika, a izračunava se kao odnos ukupnog broja negativnih ishoda na ukupan broj ne-inficiranih pacijenata. Što manje specifični, to je veća vjerojatnost lažno pozitivnih rezultata. Oba brojke su izražene kao postotak.

dijagnostička metoda mikrobiološki na osnovu detekciju patogena u biološkom materijalu. Koristite svjetlo optičkim i elektronskim mikroskopom.

Mikrobioloških metoda široko koristi u dijagnostici zaraznih bolesti bakterijske, protozoama etiologije i, rijetko, virusnih bolesti.

U praksi bakteriološkog laboratorija mikroskopski pregled u većini slučajeva ima vrijednost indikativan brzu dijagnostiku. Glavni zadaci su mikroskopija detekciju patogena u kliničkim uzorcima, približna identifikacija na osnovu određivanja karakterističnih znakova morfoloških i za bojenje bakterija, i ispitivanje obojene razmaze čistih kultura iz kolonija.

Materijal za mikroskopski pregled može biti krvi, koštane srži, likvora, pjegav limfni čvorovi, izmet, duodenuma sadržaja i žuči, urin, ispljuvak, sekret urogenitalnog trakta, biopsije tkiva, mrlje iz sluznice usta, krajnika, nosnih i drugi.

Za detekciju "krvi parazita", npr protozoa (Plasmodium malariju, tripanozoma, Leishmania, Babesia) i helminata (microfilaria), testirani droge "thin bris" i / ili "debeli kap" krvi.

Drug "debeli kap" pripremljena na dva načina:

Isušiti "debeli kap" treba postepeno u zraku, bez grijanja, pod njihovom zaštitom od oštećenja od insekata. umrljana krvlju proizvoda bez prethodne fiksacije Romanovsky-Giemsa.

da se pripremi tanak bris napraviti otisak u krvi blizu ruba slajda, a zatim ivicu uglom od 45 ° se dovodi pasti i smanjiti stakla nakon krvi širi duž ruba kontinuiranog pokreta distribuirati krvi po površini slajda. Pripremu dobila je fiksna i umrljana.

Likvor za mikrobiološki pregled donose u sterilnu epruvetu tokom lumbalnu punkciju. Za pripremu formulacije koristeći talog spontano ili centrifugiranjem.

Mrlje od usne šupljine sluznice uzeti na prazan želudac ili 2 sata nakon obroka sterilnom vatom, bris-otisak se priprema na staklenu pločicu. Kada je posljednji film zaliha uklonjeni sa sterilnim pincetom. Materijal iz nosne šupljine uzeti sa sterilnom vatom koja je duboko uvodi u nosnu šupljinu. NP bris uzeti zadneglotochnym sterilni bris uvodi se lagano kroz otvor za nos u nazofarinksa. Za analizu difterije istražiti oba filma i sluzi iz grla i nosa. Materijal iz nosa i ždrijela imaju različite tamponi.

Urin je prikupljen za mikroskopski pregled u sterilnu posudu nakon pažljivog WC spoljnih genitalija. Za pripremu formulacije pomoću sediment urina.

mikroskopski pregled podvrgnuti native (ne-fiksna, neumrljan) i obojena pripreme. U prvom slučaju otkrivaju živi mikroorganizmi u proizvodu "visi kap" ili "pad slomiti" evaluacijom pokretljivost i morfološke osobine autora. Na primjer, tamno polje mikroskopije nativnog preparata koji se koriste za dijagnozu spirochetosis (primarni sifilis, leptospiroza, epidemija (vshinogo) povratna groznica), kandidijaza ili drugih gljivičnih oboljenja. U ovim slučajevima, rezultat mikroskopskih ispitivanja daje osnova za dijagnozu.

Najkorišteniji mikroorganizama u mikroskopija boji državi, posebno za dijagnozu parazitskih bolesti (malarije, amebiasis, giardiasis, Leišmanijaza, helminthiasis). Za bojenje sredstva koja se koriste za referencu, specijalne i razlikovanje metoda. Približna bojanje nam omogućava procjenu ukupne morfologije mikroorganizama. U tu svrhu koriste standardne boje - Fuksin ili metilen plavo.

Među specifične metode koje se koriste najčešće bojenje po Gramu. Ova metoda otkriva sposobnost bakterija da zadrži boju kristal violet (ili lincure ljubičasta) ili izgubiti boju u alkoholu. Gram-pozitivne bakterije se boje ljubičasta, i gram - u crvenom, jer gube boju u alkoholu i dalje obojena magenta. Bojila gram vam omogućava da odredite primarni izbor sredstava antibiotske terapije.

Posebne metode slika uključuju Ziehl-Nielsen, koja naglašava kiseline i alkohol-štapići, posebno Mycobacterium tuberculosis, koje su obojene u crveno, a preostalih mikroorganizama - u plavoj boji.

razlikovanje poziv metode bojenja pojedinih elemenata bakterijske ćelije. Na primjer, bojenje metahromatinovyh (volyutinovyh) Uključene u bakterija (kao Neisseria, Mayer), kapsule bojenje (Giessen Leyfsonu Anthony), spore, flagella (po Leffler, Bailey, Grey i dr.), Cell zid kromatina (nuklearni) elemenata (Romanowsky-Giemsa i Pekarsky).

Mikroskopskom metode istraživanja uključuju imunofluorescencije (Fluorescent mikroskopija) koji se koristi za dijagnosticiranje bakterijskih i virusnih infekcija, a na osnovu korištenja antitela označen sa fluorescentnom bojom.

Efikasnost mikroskopske metode određena je njegova osjetljivost i specifičnost. Specifičnost ograničena moguće pogrešne identifikacije agent zbog artefakata. Pored toga, u mikroskopske tehnike ispitivanja ima vrijednost istraživanja je na primjer u dijagnostici malarije krvi testira osjetljivost metoda "debeli film" 20-40 puta veća nego u studiji tankim brisa jer ovaj lijek vam omogućuje da vidite veći volumen krvi, a pored Plasmodium u proizvodu se nalaze extracellularly kako bi se olakšalo njihovo otkrivanje i kvantifikacija.

Ipak, osjetljivost metode "debeli film", koji provodi WHO standardima (studija od najmanje 100 polja more za najmanje 5 minuta), ali ne prelazi 95% zbog nejednake distribucije krvi malarije parazita, posebno na niskom nivou parasitaemia.

Važan način da se poboljša osjetljivost metode je upotreba mikrobioloških metoda različite koncentracije patogena, kao što su padavine ili flotacija uzoraka stolice tokom studija i filtriranje kroz MILLIPORE filter uzoraka krvi, urina, likvora.

Poboljšati efikasnost mikroskopskim pregledom otkrio olakšava kvantifikaciju parazita u vidnom polju ili jedinici volumena materijala. Konkretno, malarija (posebno kada otkrivanje R.Gakpragit) važan intenzitet parasitaemia određivanju.

Kvantifikacija mikroflore u brisa, i identificiranja mikroba udruženja su važni u određivanju kada je to potrebno etiološki ulogu uvjetno patogenih mikroorganizama. Poznato je da je maksimalna otkriti koncentracija bakterija u mrlju native materijala je 10  ćelija u 1 ml. Za većinu materijala smatra se da etiološki značajan otkrivanje oportunističkih bakterija određene vrste u koncentraciji od najmanje 10 -10  ćelija u 1 ml, tako da je osjetljivost mikroskopske metode u većini slučajeva zadovoljava potrebe kliničke mikrobiologije.

Yushchuk ND, Vengerov YY

Udio u društvenim mrežama: