Onkologiya-

KP Hanson

Institut za onkologiju. prof. NN Petrov, Ministarstvo zdravlja, St. Peterburg

izvor RosOncoWeb.Ru

Onkogena ErbB2 (HER2 / neu) je na drugoj poziciji nakon supressornogogena p53 u broju publikacija posvećena pojedinačnim geneticheskomuelementu. Takva situacija je razumljivo, jer ErbB2 gen yavlyaetsyaidealnym primjer pokazuje uspjeh molekularnu onkologiju u razumijevanju temeljnih mehanizama raka, i vrazrabotke fundamentalno novih dijagnostičkih metoda onkologicheskihzabolevany i konačno pronalaženje patogenetskim podhodovk terapiji tumora. Bitno je da prakticheskoeprimenenie poznavanje ErbB2 onkogena zabrinutost onkologicheskogozabolevaniya najčešći kod žena - rak dojke (BC) (Imyanitov Knyazev, 1991- Yu, Hung, 2000).

Gene ErbB2 (HER2 / neu) je ćelijski saglasnu v-erbB onkogenavirusa eritroblastomy ptice. Njegova veličina je 4,5 kb mRNA-kodirane informacije u njemu za sintezu proteina P185 (1225 aminokiselina) .Ovaj protein ima 44% homologije na receptor epidermalnogofaktora rasta (EGF) (Coussens et al., 1985). Široka izvestnostgen ErbB2 stekao nakon objavljivanja, koji je instaliran u samo činjenicu aktiviranja u tumorima dojke, noi argumente u korist udruženja ErbB2 pojačanja splohim prognozu (Slamon et al., 1987). Blagodaryadannoy i niz drugih publikacija, klinička istraživanja aspektovaktivatsii ErbB2 uključujući i mnoge naučne grupe, s tisućama pacijenata podvrgnuto etomtestirovaniyu (Piccart et al., 2000) .U našem laboratoriju je također u stanju da pokaže osnovnyezakonomernosti uskoro ErbB2 gena u ljudskim tumorima, kotoryi potvrđuje kada objedinjenu analiza mezhlaboratornyhdannyh (Imyanitov, Prince, 1991 Imyanitov et al., 1992- Imyanitovet al., 1992, 1993 Knyazev et al., 1992).

Trenutno, glavni fokus istraživača sosredotochenona kliničke upotrebe monoklonskih antitijela (mAb) na genuERBB2 (Herceptin) i potraga za obećava nova sredstva vozdeystviyana njegove patološke aktivacije uglavnom u raka dojke (Baselga, 2001- Yu, Hung, 2000).

Molekularne mehanizme aktivacije gena ErbB2

ErbB2 je član porodice tirozin kinaze receptora erbB se sastoji od četiri funkcionalno međusobno povezanih retseptornyhmolekul, koji igraju važnu ulogu u proliferaciju, diferencijaciju i apoptozu. Ova porodica uključuje rast epidermalnyyfaktor (EGF ili ErbB1), erbB-2, erbB-3 i erbB-4. Pod deystviemligandov ErbB2 formira heterodimeri s drugim receptorima dannogosemeystva koji očigledno ima potentan potencijator effektomna rad relevantnih signalnih puteva (Harari, Yarden, 2000).

Efekt ErbB2 može dramatično povećati kada gena.Superekspressiya ErbB2 prekomjerna poboljšava ćelija tumoroge- u kulturevsledstvie spontani fosforilaciju heterodimeri obrazuemyhretseptorami i uključivanje relevantnih signalnih puteva, kao što su MAPK i PI3K (Harari, Yarden, 2000). Normalno, signali iz receptora brzo inaktiviraju zbog kompleksa dissotsiatsiiligand-receptora, i degradacije u lizozomi. Odnakoeti odbrambeni mehanizmi ne pod superekspressiiERBB2 (Klapper et al., 2000). Posebno mjesto u pokretanju i signalovprinadlezhit ERBB3, kao Ovaj kinaze defektne aktivnostiretseptor široko zastupljeni u većini epitelnih stanica, a ko-izraz sa ErbB2 ima visoko transformiruyuschimpotentsialom.

Utvrđeno da oncoprotein erbB-2 prekomerno u 20-30% tumora dojke, au slučaju intraduktalnih (neinvazivne) formi raka dojke, ta vrijednost doseže 90% (Slamon et al., 1987. Knyazevet al., 1992- Imyanitov et al., 1993). Utvrđeno je da je ligand-zavisimoyaktivatsii ErbB2 važnu ulogu pripada i drugim članovima semeystvaetih receptore. Ispostavilo se da erbB-1 je u stanju obratnoykorrelyatsii sa nivoom estrogena receptora (ER) i assotsiirovans nepovoljan tok od raka dojke (Harari, Yarden, 1999). U otnosheniisuperekspressii erbB-3 i erbB-4, kontradiktorne rezultate su dobili, iako određena tendencija da se označena korrelyatsiis pozitivnih tumora i status ER veličine (Srinivasan et al., 2000).

Jedan važan aspekt ErbB2-receptor ćelije akcije je ihsposobnost dati nezavisnost od faktorovrosta imovine. Na kraju, treba naglasiti odnos između superekspressieyERBB2 i nivoa ciklin D-tipa kavez. Nenormalno superekspressiyatsiklinov D-tip (D1, D2 i D3) aktivira CDK4 i CDK6, vklyuchaetkletochny ciklusa i promovira Tumorogeno transformaciju ćelija (Harari, Yarden, 2000).

Prognostički značaj aktiviranja erbB-2 ONCOPROTEIN

Uprkos postojanju kontradikcije u prvom frekvencija rezultatahopredeleniya ErbB2 pojačanje, do danas etisvedeniya sasvim igrivi lik (Piccart et al., 2000). Kao što je već spomenuto, ErbB2 onkogena aktiviranje nablyudaetsyaprimerno u 20-30% od raka dojke. Teže je to slučaj sa procjenom nivoa ErbB2 gena ekspressiiprodukta - P185 proteina. Prvo, velika studija chislosootvetstvuyuschih obavlja imunohistohemijski, koji je polu-kvantitativne prirode. Zachastuyupredstavlyaetsya prilično teško razlikovati gena patologicheskoyaktivatsiey (nagli porast u svom izrazu) i "fiziološki"ErbB2 proteina iznose. Drugo, većina immunogistohimicheskihrabot izvode o arhivskoj patoloških srezah- iako, teoretski, takav materijal je idealna studije meta dlyaretrospektivnyh, upotreba parafina blokovsopryazheno sa dodatnim tehničkim poteškoćama, kao što kakdegradatsiya meta antigen zbog neadekvatne konservatsiiobraztsov, različitu osjetljivost različitih antitijela, itd Treće, rani radovi ne uvijek razliku između membrane i tsitoplazmaticheskimokrashivaniem ERBB2- očigledno klinički značaj predstavlyaettolko receptor proteina obliku (van de Vijver, 2001). U principu, pažljivo provedenih studija pokazuju visok urovenkonkordantnosti između ErbB2 amplifikacije gena i oštar uvelicheniemkolichestva membranu P185 proizvoda.

Ogromna većina istraživača slaže da aktivatsiyaonkogena ErbB2 je povezan s lošom prognozom. Često, uloga štete čini se da ErbB2-posredovana, tako kakamplifikatsiya i prekomjerna ovog gena je u korelaciji sa "klasičan"prognostički parametri, kao što su kasnoj fazi bolesti, metastaze u limfnim čvorovima differentsirovkiopuholi nizak nivo, visok indeks mitotska, aneuploidni, otsutstvieestrogenovyh receptore, itd Međutim, mnogi ukazyvayuttakzhe rad na svoju ruku, nezavisno od drugih faktora prognosticheskoeznachenie uskoro ErbB2. Je bitno da takve zakonomernostispravedlivy i ruski pacijenata: posebno, naša sobstvennyeraboty otkrio snažna korelacija između pojačanje ErbB2 ponavljanja karamele raka dojke (Imyanitov et al, 1992- Imyanitov et al, 1993.).

Treba naglasiti da, iako sama činjenica prognostičkih znachimostigena ErbB2 i drugih molekularnih markera za nastoyaschemumomentu bez sumnje pri odabiru strategije liječenja reshayuscheeznachenie se daje nakon sve tradicionalne markera prognozu. Tako je bolest, informacije o statusu ErbB2 može biti uključen samo u zatrudnitelnyhsluchayah i smatra dodatnim. Konkretno, studija privukao bolshoevnimanie posvećen značaj ERBB2pri rano (posebno ne metastatski) oblika raka dojke. Otkrili su da su podaci o aktiviranju ErbB2 gena može ukazivati ​​na neobhodimostiintensifitsirovat postoperativne posmatranje, a možda i modifitsirovatskhemu tretman. Još zanimljivije je pitanje ErbB2 amplifikatsiigena neinvazivni oblik raka dojke. Otkrila je da aktivatsiyaERBB2 korelaciji sa nepovoljnim karakteristikama raka dojke in situ, posebno u comedo tipa i nizak stupanj differentsirovki.Odnako, i dalje ostaje nejasno da li udruženje postoji mezhduamplifikatsiey ErbB2 i rizik od degeneracije karcinoma in situ karcinoma dojke vinvazivnuyu obliku, i.e. da li ili ne da se uzme u obzir stanje volumena ErbB2 privybore operaciju.

Još jedan važan aspekt problema - prognozirovanieeffektivnosti terapiji tumora na osnovu evaluacije ErbB2-statusa.Dannoy tema predmet brojnih studija, rezultatykotoryh daleko od jednostavne. Ipak, glavni zaključak svoditsyak da sa visokim mliječne tumora ErbB2-retseptoraokazyvayutsya više otporna na sve vrste protivoopuholevyhvozdeystvy (hemoterapiju i radioterapiju gomono-) (Mass, 2000).

Tehnike za utvrđivanje ErbB2

To razvio niz nastavne tehnike procijeniti ErbB2 statusaopuholey, među kojima postoje tehnike pogodne samo dlyaissledovatelskih ciljeva, kao i one koje su koristili svakodnevnoj kliničkoj praksi (van de Vijver, 2001). U kachestvemolekulyarnyh ciljeve u različitim slučajevima DNK, RNK, proteina iliretseptornye. Može se smatrati općenito je prihvaćeno da je najviše primjenjuje u situgibridizatsiya fluorescentne (FISH) za otsenkiamplifikatsii ErbB2 gena. Međutim, nisu sve praktične laboratoriiispolzuyut RIBE, uglavnom zbog svoje kompleksnosti i dlitelnostivypolneniya. Sauzern- i Northern blot i razne embodiments polimeraznoytsepnoy reakcija, koja služi za cilj DNA i RNA primenyayutpreimuschestvenno u istraživačke svrhe (Dowsett et al., 2000).

U praksi do sada dominantna prinadlezhitimmunogistohimicheskomu (IHC) definiranje ErbB2. Ovo metodikadostatochno specifična, brzo i lako moguće, i dostupan je za većinu laboratorija. S obzirom da je osjetljivost IHC zavisitot mAb koriste, preporučuje se da se radi sa standardnim naboramiantitel, posebno kompanija HercepTestTM "DAKO" (Espinoza, Anguiano, 1999). Moguće je, međutim, da automatizacija fishi približavanje PCR postupke za praktične probleme mogu izmenitsituatsiyu, i ove tehnike će zamijeniti manje specifične IHC.

ErbB2 - meta hemoterapiji

ErbB2 receptora postala u posljednjih nekoliko godina, glavni molekularni meta, koji ima za cilj da tragaju za novim modernim metodama liječenja brojnih načina RMZh.Izvesten specifične suzbijanje ErbB2 aktivnosti prvo mjesto među njima svakako spada u ICA ekstrakletochnomudomenu receptor proteina (Yu, Hung, 2000). U početku byloustanovleno da mišje mAb 4D5 Sposobnost da inhibira rast kletokRMZh sa povećanim izraz ErbB2. Međutim myshinyhMKA imunogenost ograničena njihove kliničke upotrebe (Baselga, 2001). Poetomumyshinye mAb 4D5 je podvrgnut postupku tzv humanizacije, tj soediniliih domeni, komplementarnost utvrđivanje da ErbB2 receptora SG1-ljudskog imunoglobulina. Rezultirajući mAb pojavio vysokoeffektivnymsredstvom suzbijanje rasta tumorskih ćelija i stečenih shirokuyuizvestnost zove lijek Herceptin (Trastuzumab). Oniproshli detaljne pretkliničkih i kliničkih ispitivanja i u liječenju metastatskog uspeshnoispolzuyutsya ErbB2 pozitivnog raka dojke (Baselga, 2001). Herceptin ima izražen uvjete protivoopuholevoyaktivnostyu u monoterapiji iu kombinaciji sa izvestnymihimiopreparatami (taksane, antraciklina antibiotika iproizvodnymi platina).

Mnogo manje je poznato do sada su drugi pristupi modifikatsiiekspressii ErbB2. Tako, na primjer, dokazano je vozmozhnostinaktivatsii ErbB2 gena na transkripcije nivou preko adenovirusnogobelka E1A. Ovaj protein inhibira rast eksperimentalno i metastazirovanieopuholey karakterizira prekomjerna ErbB2. To pokazaltakzhe njihovu efikasnost u fazi I kliničkih ispitivanja (Yu, Hung, 2000).

Prekomjerna od ErbB2 neminovno u kombinaciji sa visokim urovnemaktivnosti odgovarajućim tirozin kinaze. Stoga dannogofermenta inhibitori mogu imati antitumorska aktivnost koja nashlopolnoe potvrđeno u izvršena ispitivanja. Većina podrobnoizuchen inhibitor tirozin kinaze ErbB2 Emodina suzbijanje fosforiliruyuschuyuaktivnost enzima i rasta tumora (Zhang et al., 1995).

Opisao uspješnih pokušaja da se suzbije ErbB2 receptora pomoschyugennyh konstruira kodiraju intracelularni anti-ErbB2 odnospiralnyeantitela (Yu, Hung, 2000). Slični efekti imaju takzhegeneticheski projektovan anti-ErbB2 mimetički peptid.

Inhibitorni učinak na ErbB2 prekomjerna obladayutproizvodnye retinolska kiselina receptora, posebno u kombinaciji sa himiopreparatami.V nedavno privukao pažnju stvaranju vakcine proyavlyayuscheyaktivnost protiv tumora prekomjernom ekspresijom ErbB2 (Murrayet al., 2000). Pomoću proteina i DNA vakcine upravlja dostichingibirovaniya ErbB2 prekomjerna i suzbijanje dojke rast spontannyhopuholey u miševa.

Konačno, specifične blokade ErbB2 transkripcije gena vozmozhnodostich koristeći antisens oligonukleotida (AO) (Roh et al., 2000). Vezivanje SA u komplementarne mRNA dovodi do njegove degradacije, kao posljedica toga, sinteza blokira ErbB2 receptora. Pretpostavlja se da je AD mogu biti efikasniji inhibitori ErbB2.

Dakle, do sada postignuti razumijevanje biologicheskoyroli ErbB2 u normalnim fiziologije i tumorskih stanica rostestalo ključ za racionalan izbor terapijskih strategija na osnovu specifične efekte na odgovarajućim metabolicheskieputi. Terapija tumora naći novi kvalitet zbog vnedreniemtumorspetsificheskih antitijela usmjerena protiv ErbB2. Naryadus te se predlažu, kao i mnoge druge nove antitumorska sredstva, među kojima su inhibitori tirozin kinaze aktivnost liganda i transkripcija blokatore. Vedetsyaintensivny potragu za drugim sredstvima uticaja na raznim zvenyasignalnyh kaskade povezane sa ErbB2. Uprkos sereznyeuspehi koristiti dostignuća osnovnih nauke u klinicheskoypraktike, još uvijek postoje mnogi nejasnoća funktsionirovaniyaERBB2 koja ne dopušta da proceni svoje prognostičku vrijednost diagnosticheskoei i odnose sa hormonalnim signalima.

Osim toga, naše znanje o molekularnom prirode vzaimodeystviymezhdu faktora rasta i receptora kao ErbB2 nedostatochny.Eto sprečava u potrazi specifičnih antagonista podaci molekule koje bi mogle imati anti-tumor aktivnosti. Očigledno je da su vitalne funkcije stanica, uključujući epitelne, nahoditsyapod kontrolirati ne jedan, već mnogo signalnih sistema. Vyyasnenievzaimodeystvy između ErbB2 proteina i G1-protein receptore, citokina receptore, prianjanje molekula, itd novyegorizonty otvoriti i za osnovna istraživanja i za poiskanovyh sredstva antineoplastičnih terapije.

Ostaje nejasno i neke aspekte deystviyaanti-ErbB2 mehanizam antitijela, posebno njihovu sposobnost da poboljša kardiotoksichnosthimiopreparatov. Možda je tajna će biti riješen, kogdastanet jasno ErbB2 receptora utjecati apoptoze. Nesomnennoodno: teže praktične zadatke koji smo postavili za sebe, što se više javljaju pitanja, generira vzaimoproniknoveniemfundamentalnyh i kliničke studije.

reference:

1. Imyanitov EN Knyazev PG Onkogena aktiviranje erbB-2 ONCOPROTEIN prognoztecheniya i raka dojke kod ljudi // problema. Oncol. - 1991.- T. 37? 5 - C. 527-534.

2. Imyanitov EN, Chernitsa OI Ivanova OA itd Amplifikatsiyaonkogena erbB-2 (HER-2 / neu) u mliječne tumora -. prognosticheskiymarker vjerojatnost relapsa // Exper. Oncol. - 1992. - T. 14,? 4. - C. 25-29.

3. Baselga J. Klinička ispitivanja od Herceptin (trastuzumab) // Eur.J. Rak. - 2001. - Vol. 37, Suppl 1. - P. S18 - S24.

4. Coussens L., Yang-Feng T.L., Liao Y.-C. et al. Tirozin kinasereceptor s velikim homologije na EGF receptor akcija chromosomallocation sa neu onkogena // znanosti. - 1985. - Vol. 230. - P.1132 - 1139.

5. Dowsett M., Cooke T., Ellis I. et. al. Procjena HER2status u raka dojke: zašto, kada i kako? // Eur. J. Cancer.- 2000. - Vol. 36. - P. 170-176.

6. Espinoza F., Anguiano A. HercepTest test: druge perspektive // ​​J. Clin. Oncol. - 1999. - Vol. 17. - P. 2293-2294.

7. Harari D, Yarden Y. Molekularni mehanizmi u osnovi ErbB2 / HER2action u raka dojke // Oncogene. - 2000. - Vol. 19. - P. 6102- 6114.

8. Imyanitov E.N., Chernitsa ň.ď., Serova O.M., Knyazev P.G.Rare pojava amplifikacija HER-2 (erbB-2 / neu) oncogenein jajnika pacijenata rak // Eur. J. Rak. - 1992. - Vol. 28A.- P. 1300.

9. Imyanitov E.N., Chernitsa ň.ď., Serova O.M. et al. Amplificationof HER-2 (erbB-2 / neu) onkogena kao najznačajniji prognosticfactor u grupi ruskih pacijenata od raka dojke // Neoplasma.- 1993. - V. 40. - P. 35 - 39.

10. Klapper L.N., Waterman H., Sela M., Yarden J. tumor-inhibitoryantibodies u HER-2 / erbB-2 može djelovati zapošljavanjem c-Cbl i enhancingubiquitination HER-2 // Cancer Res. - 2000. - Vol. 60. - P.3384 - 3388.

11. Knyazev P.G., Imyanitov E.N., Chernitsa ň.ď. et al. Amplificationof erbB-2 (HER-2 / neu) onkogena u različitim tumori patientsfrom SSSR // Oncology. - 1992. - Vol. 49. - P. 162-165.

12. Masa R. Uloga HER-2 izražavanja u predviđanju responseto terapiju raka dojke // Semin. Oncol. - 2000. - Vol. 27, Suppl 11. - P. 46-52.

13. Murray JL, Przepiórka D, Ioannides CG. Klinička ispitivanja NJOJ-2 / neu-specifična cjepiva // Semin. Oncol. - 2000. - Vol. 27, Suppl 11. - P. 71 - 75.

14. Piccart M.J., Di Leo A., Hamilton A. HER2: a `predictivefactor` spreman za upotrebu u svakodnevnom upravljanju dojke cancerpatients? // Eur. J. Rak. - 2000. - Vol. 36. - P. 1755-1761.

15. Roh H., Pippin J.A., Green D.W. et al. HER2 / neu antisensetargeting ljudskog karcinoma dojke // Oncogene. - 2000. - Vol.19. - P. 6138-6143.

16. Slamon D.J., Glarn G.M., Wong S.G. et al. Ljudski rak dojke: korelacija relapsa i opstanak sa pojačanje theHER-2 / neu onkogena // znanosti. - 1987. - Vol. 235. - P. 177 -182.

17. Srinivasan R., Gillett C.E., Barnes D.M., Gillick W.J. Nuclearexpression faktora rasta receptora c-erbB-4 / HER-4 u invasivebreast raka // Cancer Res. - 2000. - Vol. 60. - P. 1483-1487.

18. van de Vijver M.J. Procjena potreba i appropriatemethod za testiranje za ljudski receptor epidermalnog faktora rasta-2 (HER2) // cijena. J. Rak. - 2001. - Vol. 37, Suppl 1. - P. S11- S17.

19. Yu D., Hung član savjeta Prekomjerna od ErbB2 raka i ErbB2-targetingstrategies // Oncogene. - 2000. - Vol. 19. - P. 6115-6121.

20. Zhang L., Chang Č.J., Bacus S.S., Hung član savjeta Potisnuti transformationand izazvane diferencijaciju HER-2 / neu prekomjernom ekspresijom BreastCancer ćelija emodin // Cancer Res. - 1995. - Vol. 55. - P.3890 - 3896.