Metode za mikroskopski pregled mikroorganizama

Video: Microbiology. Priprema fiksni pripreme (E. Zvonaryova)

Najmanji veličine mikroorganizama su odgovorni za korištenje bakterija proučiti morfologiju preciznih optičkih instrumenata - mikroskopi. Najčešće se koristi jasno vidno polje mikroskopije, tamno polje mikroskopije, faza kontrast i fluorescentne mikroskopije. Za posebne mikrobiološke studije koje koriste elektronskim mikroskopom.

jasno vidno polje mikroskopija

Bright polje mikroskopije se vrši pomoću konvencionalnog svjetlosnog mikroskopa, glavni dio koji je objektiv. Na rubu objektiva označen uvećanja: 8, 10, 20, 40, 90.

U studiji mikroba koristi potapanja sistema (objektiva). Immersion objektiv uronjen u kapi cedra ulje, primijeniti na droge. Cedar ulje ima isti indeks prelamanja kao staklo, a to se postiže najmanji skatera zrake svjetlosti (sl. 1.12).

Sl. 1.12. zrake kursa u uranjanje objektiv

Slika dobiti kroz objektiv povećava okular koji se sastoji od dva objektiva. U domaćoj mikroskop okulari se koriste sa sve većim 7, 10, 15 (sl. 1.13). Ukupnog uvećanje mikroskopa određuje proizvod objektiva za povećanje uvećanja okulara. Mikrobiologije se obično koristi za povećanje u 900-1000 puta. Kvaliteta mikroskopa ne ovisi o stupnju povećanja, ali na njegovo rješavanje.

Sl. 1.13. Shema složenim svjetlosnim mikroskopom za posmatranje u jasno vidno polje, prilagođen za osvjetljenje Koehler

Ovim moramo razumjeti najkraća udaljenost između dvije točke je preparat u kojem su jasno razlikuju pod mikroskopom. Rezolucija konvencionalnih mikroskopima sa sistemom potapanja je 0,2 mikrona.

Darkfield mikroskopije

Mikroskopija u tamnom polju pogled je zasnovan na principu (sl. 1.14). Zrake osvjetljavaju objekt nije na dnu, i sa strane i ne spadaju u oku posmatrača: vidnog polja i dalje je mrak, a objekat je osvijetljen na pozadini. To se postiže poseban kondenzator (paraboloid) ili konvencionalni kondenzator, pokriven u središtu kruga crnog papira.

Sl. 1.14. Vožnje mikroskop za posmatranje u tamnom polju.

Pripreme za Darkfield mikroskopije se priprema na tipa "visi" i "slomiti" kap. Prilikom pripreme droge "slomiti" kap ispitnog materijala (bakterijske kulture u slane) se primjenjuje na staklenu pločicu, koja je obložena staklom. Anyag ispunjava sav prostor između poklopca i slajd da se formira još sloj. Za pripremu "visi" padne potrebno koristiti posebne stakla slajdove sa pauzu u čaše centar i poklopac.

U sredini poklopca staklom obložena ispitnog materijala. Ivica žljebova na slajdu staklo umrljan vazelin, i oni su pokrivali stakleni poklopac, tako da je pad bio protiv produbljivanja centar. Zatim obrnuti priprema pokrovno gore. Darkfield mikroskopije se koristi za proučavanje živih organizama neobojene.

Fazne razlike mikroskopije

Prilikom prolaska svjetlosnog snopa kroz ahromatsku objekta mijenja samo faza fluktuacije svjetlosti vala koji se ne percipira od strane ljudskog oka. Dok slika je kontrast, neophodno je da se transformiše promjene faze u vidljivom svjetlu amplituda vala. To se postiže faznokontrasnih kondenzator objektiv i faze (sl. 1.15).

Sl. 1.15. Shema fazni kontrast mikroskopom.

Fazne razlike kondenzator je konvencionalno objektiv sa revolverom i set prstenaste membrane za svaki objektiv. A faza objektiv ima faza ploča koja se dobije primjenom rijetkih soli na objektivu. Slika prstenastog dijafragma prsten poklapa sa fazom odgovarajuće objektivne ploča.

Fazni kontrast mikroskopija značajno poboljšava kontrast objekta, i koristi se za proučavanje izvornih pripreme.

fluorescentne mikroskopije

Fluorescentne mikroskopije se temelji na sposobnosti određenih supstanci pod uticajem incidenta svjetlo Beaming na drugoj strani (obično veća) valne duljine (fluorescentno). Takve tvari se nazivaju Fluorohromno (akridin žuta, rodamin, itd). Objekt tretira Fluorohromno ultraljubičastom svjetlu dobiva svijetle boje u mraku vidnom polju.

Glavni dio fluorescentni mikroskop je iluminator koji imaju lampu i ultraljubičasti filter sistem boja uz nju (Sl. 1.16). To je važno koristiti ne-fluorescentna potapanje ulja.
Fluorescentne mikroskopije se koristi u praktičnom mikrobiologije za signaliziranje i identifikaciju infektivnih agenasa.

Sl. 1.16. Šematski prikaz fluorescentnim mikroskopom: 1 - 2 luk lampa- - Quartz kolektor 3 - kivetu ispunjen medicinu sulfat rješenje 4 - prednji kollektora- 5 - UV filter na 6 - 7. prizma- - ploča urana stekla- 8 - očni filter upijajući
ultraljubičaste zrake.

elektronska mikroskopija

Značajke optičkih mikroskopa ograničena prevelika valne duljine vidljive svjetlosti (6000 A). Objekti koji su manji nego ove vrijednosti su izvan rezolucije svjetlosnog mikroskopa. U elektronskim mikroskopom, umjesto svjetlosti valova pomoću elektronskog snopa koji imaju izuzetno kratko valne duljine i visoke rezolucije (sl. 1.17).

Sl. 1.17. Shema prijenos elektronski mikroskop.

Kao izvor elektrona grede elektronski top koristi, osnovica je volframa žica grije električnom strujom. Između volfram i anoda na putu elektrona je električni visokog napona polje. Snop elektrona uzrokuje sjaj ekrana fluorescentne. Prolazeći kroz objekat čije dijelove imaju različite debljine, elektroni će se odgovarajuće kasni, koji će se manifestovati na ekranu porcije sve tamnije. Objekta preuzima kontrast.

Formulacije pripremljen za elektronsku mikroskopiju u najboljim koloidno filmova ispitana je nakon objektima sušenja ( "maternji droga"), prave maske pomoću teških metala, ultratanki sekcije metoda replika, i drugi.

Elektronska mikroskopija može otkriti najmanji strukturu dobiti povećanje do 200 000 ili pogledajte veličinu objektima 0.002 mikrona.

LV Timošenko, MV Chubik

Udio u društvenim mrežama:

Povezani